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Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)

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    (Spanish/Español translation by Paula Corbacho, IES Lenguas Vivas "J R Fernández", Buenos Aires, Argentina. Reviewed by Dr. Gabriela Gorelik, University of Michigan)
    El ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas o ELISA es un formato de uso habitual para pruebas serológicas.
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    El propósito de esta animación es explicar cómo funciona este ensayo.
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    Las serologías por ELISA se suelen realizar en placas de microtitulación de múltiples pocillos, de forma tal que las diluciones del suero
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    se pueden preparar y probar fácilmente.
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    Para entender mejor cómo se realiza este ensayo, veamos más de cerca lo que sucede en
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    uno de los pocillos de esta placa.
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    Para realizar el ensayo, los pocillos se recubren con el antígeno de interés.
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    En los ELISA comerciales, esto lo hace el fabricante del ensayo.
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    Para comenzar la prueba, los pocillos se llenan con diluciones del suero del paciente.
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    Si los anticuerpos contra el antígeno están presentes, se unirán al antígeno que está fijado
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    al fondo de los pocillos.
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    Pero solo los anticuerpos antígeno-específicos se unirán a los pocillos.
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    Luego, los pocillos se lavan para eliminar todos los anticuerpos que no se unieron.
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    A continuación, se añade una solución de un anticuerpo animal contra anticuerpos humanos.
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    Este segundo anticuerpo está conjugado con una enzima de manera covalente.
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    Los pocillos se lavan de nuevo, esta vez para eliminar cualquier complejo anticuerpo-enzima que no se haya unido.
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    Finalmente, se agrega una solución del sustrato enzimático generador de color.
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    La interacción del sustrato con la enzima del segundo anticuerpo produce un
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    color visible.
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    El desarrollo de color en los pocillos que contienen los anticuerpos específico se pueden observar a simple
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    vista o se pueden cuantificar con un lector electrónico de placas.
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    La reacción es menos intensa a medida que la dilución del suero aumento y que la cantidad de anticuerpo capturado
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    en los pocillos disminuye.
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    El título corresponde a la dilución más alta que presenta desarrollo de color definido.
Title:
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)
Description:

This short animation demonstrates enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to measure specific antibodies. This resource was developed by Cary Engleberg of the University of Michigan. It is part of a larger learning module about laboratory methods for clinical microbiology. The full learning module, editable animation, and video transcript are available at http://open.umich.edu/education/med/oernetwork/med/microbiology/clinical-microbio-lab/2009. Copyright 2009-2010, Cary Engleberg. This is licensed under a Creative Commons Attribution Noncommercial 3.0 License http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/.
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Video Language:
English
Duration:
01:50

Spanish subtitles

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