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Dialogue: 0,0:00:00.02,0:00:06.08,Default,,0000,0000,0000,,(Spanish/Español translation by Paula Corbacho, IES Lenguas Vivas "J R Fernández", Buenos Aires, Argentina. Reviewed by Dr. Gabriela Gorelik, University of Michigan)\NEl ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas o ELISA es un formato de uso habitual para pruebas serológicas.
Dialogue: 0,0:00:06.08,0:00:13.09,Default,,0000,0000,0000,,El propósito de esta animación es explicar cómo funciona este ensayo.
Dialogue: 0,0:00:13.09,0:00:19.75,Default,,0000,0000,0000,,Las serologías por ELISA se suelen realizar en placas de microtitulación de múltiples pocillos, de forma tal que las diluciones del suero
Dialogue: 0,0:00:19.75,0:00:21.10,Default,,0000,0000,0000,,se pueden preparar y probar fácilmente.
Dialogue: 0,0:00:21.10,0:00:26.57,Default,,0000,0000,0000,,Para entender mejor cómo se realiza este ensayo, veamos más de cerca lo que sucede en
Dialogue: 0,0:00:26.57,0:00:29.15,Default,,0000,0000,0000,,uno de los pocillos de esta placa.
Dialogue: 0,0:00:29.15,0:00:33.07,Default,,0000,0000,0000,,Para realizar el ensayo, los pocillos se recubren con el antígeno de interés.
Dialogue: 0,0:00:33.07,0:00:38.18,Default,,0000,0000,0000,,En los ELISA comerciales, esto lo hace el fabricante del ensayo.
Dialogue: 0,0:00:38.18,0:00:43.00,Default,,0000,0000,0000,,Para comenzar la prueba, los pocillos se llenan con diluciones del suero del paciente.
Dialogue: 0,0:00:43.00,0:00:47.43,Default,,0000,0000,0000,,Si los anticuerpos contra el antígeno están presentes, se unirán al antígeno que está fijado
Dialogue: 0,0:00:47.43,0:00:49.01,Default,,0000,0000,0000,,al fondo de los pocillos.
Dialogue: 0,0:00:49.01,0:00:55.00,Default,,0000,0000,0000,,Pero solo los anticuerpos antígeno-específicos se unirán a los pocillos.
Dialogue: 0,0:00:55.00,0:00:59.83,Default,,0000,0000,0000,,Luego, los pocillos se lavan para eliminar todos los anticuerpos que no se unieron.
Dialogue: 0,0:00:59.83,0:01:05.00,Default,,0000,0000,0000,,A continuación, se añade una solución de un anticuerpo animal contra anticuerpos humanos.
Dialogue: 0,0:01:05.00,0:01:10.01,Default,,0000,0000,0000,,Este segundo anticuerpo está conjugado con una enzima de manera covalente.
Dialogue: 0,0:01:10.01,0:01:16.98,Default,,0000,0000,0000,,Los pocillos se lavan de nuevo, esta vez para eliminar cualquier complejo anticuerpo-enzima que no se haya unido.
Dialogue: 0,0:01:16.98,0:01:21.03,Default,,0000,0000,0000,,Finalmente, se agrega una solución del sustrato enzimático generador de color.
Dialogue: 0,0:01:21.03,0:01:26.23,Default,,0000,0000,0000,,La interacción del sustrato con la enzima del segundo anticuerpo produce un
Dialogue: 0,0:01:26.23,0:01:27.66,Default,,0000,0000,0000,,color visible.
Dialogue: 0,0:01:27.66,0:01:32.10,Default,,0000,0000,0000,,El desarrollo de color en los pocillos que contienen los anticuerpos específico se pueden observar a simple
Dialogue: 0,0:01:32.10,0:01:37.06,Default,,0000,0000,0000,,vista o se pueden cuantificar con un lector electrónico de placas.
Dialogue: 0,0:01:37.06,0:01:42.03,Default,,0000,0000,0000,,La reacción es menos intensa a medida que la dilución del suero aumento y que la cantidad de anticuerpo capturado
Dialogue: 0,0:01:42.03,0:01:44.08,Default,,0000,0000,0000,,en los pocillos disminuye.
Dialogue: 0,0:01:44.08,0:01:48.08,Default,,0000,0000,0000,,El título corresponde a la dilución más alta que presenta desarrollo de color definido.