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(Spanish/Español translation by Paula Corbacho, IES Lenguas Vivas "J R Fernández", Buenos Aires, Argentina. Reviewed by Dr. Gabriela Gorelik, University of Michigan)
El ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas o ELISA es un formato de uso habitual para pruebas serológicas.

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El propósito de esta animación es explicar cómo funciona este ensayo.

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Las serologías por ELISA se suelen realizar en placas de microtitulación de múltiples pocillos, de forma tal que las diluciones del suero

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se pueden preparar y probar fácilmente.

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Para entender mejor cómo se realiza este ensayo, veamos más de cerca lo que sucede en

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uno de los pocillos de esta placa.

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Para realizar el ensayo, los pocillos se recubren con el antígeno de interés.

00:00:33.071 --> 00:00:38.179
En los ELISA comerciales, esto lo hace el fabricante del ensayo.

00:00:38.179 --> 00:00:43.000
Para comenzar la prueba, los pocillos se llenan con diluciones del suero del paciente.

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Si los anticuerpos contra el antígeno están presentes, se unirán al antígeno que está fijado

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al fondo de los pocillos.

00:00:49.014 --> 00:00:55.005
Pero solo los anticuerpos antígeno-específicos se unirán a los pocillos.

00:00:55.005 --> 00:00:59.829
Luego, los pocillos se lavan para eliminar todos los anticuerpos que no se unieron.

00:00:59.829 --> 00:01:05.004
A continuación, se añade una solución de un anticuerpo animal contra anticuerpos humanos.

00:01:05.004 --> 00:01:10.014
Este segundo anticuerpo está conjugado con una enzima de manera covalente.

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Los pocillos se lavan de nuevo, esta vez para eliminar cualquier complejo anticuerpo-enzima que no se haya unido.

00:01:16.979 --> 00:01:21.028
Finalmente, se agrega una solución del sustrato enzimático generador de color.

00:01:21.028 --> 00:01:26.229
La interacción del sustrato con la enzima del segundo anticuerpo produce un

00:01:26.229 --> 00:01:27.659
color visible.

00:01:27.659 --> 00:01:32.096
El desarrollo de color en los pocillos que contienen los anticuerpos específico se pueden observar a simple

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vista o se pueden cuantificar con un lector electrónico de placas.

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La reacción es menos intensa a medida que la dilución del suero aumento y que la cantidad de anticuerpo capturado

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en los pocillos disminuye.

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El título corresponde a la dilución más alta que presenta desarrollo de color definido.