Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)

This short animation demonstrates enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to measure specific antibodies. This resource was developed by Cary Engleberg of the University of Michigan. It is part of a larger learning module about laboratory methods for clinical microbiology. The full learning module, editable animation, and video transcript are available at http://open.umich.edu/education/med/oernetwork/med/microbiology/clinical-microbio-lab/2009. Copyright 2009-2010, Cary Engleberg. This is licensed under a Creative Commons Attribution Noncommercial 3.0 License http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/.

(Chinese-Simplified translation by Holly YF Chung, University of Michigan Graduate Student)
酵素免疫分析法，或称ELISA，是一种常用的血清学检测方式。

这个动画是用来解释ELISA是如何操作的。

ELISA血清学检测法，通常是在多孔微阵列盘上操作。所以，

稀释不同倍数的血清可以方便的在多孔盘上制备、操作。

为了让我们理解ELISA是如何操作，

先让我们专注在一个孔槽里面发生的事情。

进行测定前，多个槽里的每个小孔里都已被涂上目标抗原。

如果是商业性的检测，制造商会把这个步骤先做好。

开始测试时，孔槽会装盛稀释过的病人血清。

如果病人血清中有抗体存在，它们会和已经在孔壁上的抗原结合，

而被固定在(卡在)孔槽底部。

但是，只有抗原特異性的抗體才會緊緊地和抗原結合而被固定在孔槽中。

接着，(用缓冲液冲)洗出未和目标抗原相结合的抗体。

然后，加入含有动物抗体的溶液。 (*注；此动物抗体是能够抗人体抗体的。)

这第二(动物)抗体有个用共价键相连的酶。

各孔槽再t冲洗一遍，但这次，是为了
冲除没有和目标抗体相结合的第二抗体(与酶共价结合)。

最后，加入一个可以使酶呈色的受质。

因着不同浓度的目标抗体存在，孔槽溶液会产生不同程度的颜色变化。

因着不同浓度的目标抗体存在，孔槽溶液会产生不同程度的颜色变化。

这样的颜色变化，可以用肉眼辨识，或是用多孔盘电子读取器量化抗体浓度。

血清浓度随着稀释而降低，能够和抗原产生反应的抗体浓度也因而随之下降

所以颜色变化也因而由浓变淡。

效价，是指最大的抗体稀释浓度所呈现一定程度的颜色变化。