(Chinese-Simplified translation by Holly YF Chung, University of Michigan Graduate Student) 酵素免疫分析法,或称ELISA,是一种常用的血清学检测方式。 这个动画是用来解释ELISA是如何操作的。 ELISA血清学检测法,通常是在多孔微阵列盘上操作。所以, 稀释不同倍数的血清可以方便的在多孔盘上制备、操作。 为了让我们理解ELISA是如何操作, 先让我们专注在一个孔槽里面发生的事情。 进行测定前,多个槽里的每个小孔里都已被涂上目标抗原。 如果是商业性的检测,制造商会把这个步骤先做好。 开始测试时,孔槽会装盛稀释过的病人血清。 如果病人血清中有抗体存在,它们会和已经在孔壁上的抗原结合, 而被固定在(卡在)孔槽底部。 但是,只有抗原特異性的抗體才會緊緊地和抗原結合而被固定在孔槽中。 接着,(用缓冲液冲)洗出未和目标抗原相结合的抗体。 然后,加入含有动物抗体的溶液。 (*注;此动物抗体是能够抗人体抗体的。) 这第二(动物)抗体有个用共价键相连的酶。 各孔槽再t冲洗一遍,但这次,是为了 冲除没有和目标抗体相结合的第二抗体(与酶共价结合)。 最后,加入一个可以使酶呈色的受质。 因着不同浓度的目标抗体存在,孔槽溶液会产生不同程度的颜色变化。 因着不同浓度的目标抗体存在,孔槽溶液会产生不同程度的颜色变化。 这样的颜色变化,可以用肉眼辨识,或是用多孔盘电子读取器量化抗体浓度。 血清浓度随着稀释而降低,能够和抗原产生反应的抗体浓度也因而随之下降 所以颜色变化也因而由浓变淡。 效价,是指最大的抗体稀释浓度所呈现一定程度的颜色变化。