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Imunoensaio enzimático (IEE) para detectar antígenos

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    (Portuguese translation by Marina S. Rodrigues. Revisão: Pedro Polidoro).
    Muitos testes rápidos de diagnóstico detectam
    antígenos específicos em amostras biológicas
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    usando um imunoensaio enzimático.
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    O objetivo desta animação é explicar
    como funciona um protótipo deste teste.
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    O imunoensaio enzimático pode ser feito em uma placa de microtitulação com múltiplos poços ou em qualquer outra superfície sólida
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    de aderência.
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    Eu vou usar a placa de microtitulação neste exemplo. Então, vamos dar uma olhada em um dos poços
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    deste teste para ver o que acontece
    durante a realização do ensaio.
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    A placa é preparada para realizar um ensaio específico
    pelo revestimento dos poços com anticorpos
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    que se ligam ao antígeno de interesse.
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    Então os poços são preenchidos com amostra
    clínica, o que poderia ser uma amostra de soro,
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    secreções respiratórias, líquido cefalorraquidiano,
    urina ou algum outro fluido corporal.
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    Se o antígeno estiver presente na amostra,
    ele se ligará aos anticorpos fixos.
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    Neste exemplo, a forma verde representa
    o antígeno de interesse e as outras formas
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    representam outras moléculas na amostra.
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    Entretanto, note que apenas o antígeno específico,
    ou verde, e nenhuma das moléculas irrelevantes,
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    liga-se aos poços revestidos por anticorpos.
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    Isso explica a especificidade do teste.
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    Os poços são então lavados para remover
    qualquer molécula não ligada deixando o antígeno
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    de interesse preso aos poços.
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    Agora é adicionado um segundo anticorpo,
    dirigido contra outro epítopo no antígeno alvo.
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    Estes anticorpos são conjugados covalentemente
    a uma enzima indicada pelo círculo amarelo
  • 1:25 - 1:28
    na porção FC do segundo anticorpo.
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    Eles se ligam ao antígeno fixo no poço
    fornecendo um segundo nível
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    de especificidade para o ensaio.
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    Os poços são lavados novamente para remover quaisquer anticorpos não ligados e na etapa final uma solução
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    de substrato enzimático cromogênico é adicionada.
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    A interação do substrato e da enzima
    capturada gera uma cor visível na
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    solução.
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    No nível macroscópico, o desenvolvimento
    de cor indica as amostras que têm
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    anticorpo secundário ligado
    ao antígeno alvo dos poços.
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    Assim, os poços que mudam de cor
    são os que contêm o antígeno de interesse,
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    em outras palavras, os resultados positivos.
Title:
Imunoensaio enzimático (IEE) para detectar antígenos
Description:

Esta curta animação demonstra a detecção de antígenos específicos utilizando o imunoensaio enzimático. Este material foi desenvolvido por Cary Engleberg da Universidade de Michigan. E faz parte de um módulo maior de ensino sobre métodos laboratoriais para microbiologia clínica. O modulo completo, a animação editável e o transcrito do vídeo estão disponíveis em http://open.umich.edu/education/med/oernetwork/med/microbiology/clinical-microbio-lab/2009. Copyright 2009-2010, Cary Engleberg. O material está sob licença Creative Commons Atribuição-Uso-Não-Comercial. Licença 3.0 http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/.
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Video Language:
English
Duration:
02:06

Portuguese subtitles

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