Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)

This short animation demonstrates enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to measure specific antibodies. This resource was developed by Cary Engleberg of the University of Michigan. It is part of a larger learning module about laboratory methods for clinical microbiology. The full learning module, editable animation, and video transcript are available at http://open.umich.edu/education/med/oernetwork/med/microbiology/clinical-microbio-lab/2009. Copyright 2009-2010, Cary Engleberg. This is licensed under a Creative Commons Attribution Noncommercial 3.0 License http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/.

(Chinese-Traditional translation by Holly YF Chung, University of Michigan Graduate Student)
酵素免疫分析法，或稱ELISA，是一種常用的血清學檢測方式。

這個動畫是用來解釋ELISA是如何操作的。

ELISA血清學檢測法，通常是在多孔微陣列盤上操作。所以，

稀釋不同倍數的血清可以方便的在多孔盤上製備、操作。

為了讓我們理解ELISA是如何操作，

讓我們專注在一個孔槽裡面發生的事情。

進行測定前，多個槽裡的每個小孔裡都已被塗上目標抗原。

如果是商業性的檢測，製造商會把這個步驟先做好。

開始測試時，孔槽會裝盛稀釋過的病人血清。

如果病人血清中有抗體存在，它們會和已經在孔壁上的抗原結合，

而被固定在(卡在)孔槽底部。

但是，只有抗原特異性的抗體才會緊緊地和抗原結合而被固定在孔槽中。

接著，(用緩衝液沖)洗出未和目標抗原相結合的抗體。

然後，加入含有動物抗體的溶液。(*註；此動物抗體是能夠抗人體抗體的。)

這第二(動物)抗體有個用共價鍵相連的酶。

各孔槽再t沖洗一遍，但這次，是為了
沖除沒有和目標抗體相結合的第二抗體 (與酶共價結合)。

最後，加入一個可以使酶呈色的受質。

受質和第二抗體上的酶作用後，就會產生顏色。

因著不同濃度的目標抗體存在，孔槽溶液會產生不同程度的顏色變化。

這樣的顏色變化，可以用肉眼辨識，或是用多孔盤電子讀取器量化抗體濃度。

血清濃度隨著稀釋而降低，能夠和抗原產生反應的抗體濃度也因而隨之下降

所以顏色變化也因而由濃變淡。

效價，是指最大的抗體稀釋濃度所呈現一定程度的顏色變化。