Staining of a Gram-Positive Bacterium

This short animation demonstrates a gram stain of gram-positive bacterium. This resource was developed by Cary Engleberg of the University of Michigan. It is part of a larger learning module about laboratory methods for clinical microbiology. The full learning module, editable animation, and video transcript are available at http://open.umich.edu/education/med/oernetwork/med/microbiology/clinical-microbio-lab/2009. Copyright 2009-2010, Cary Engleberg. This is licensed under a Creative Commons Attribution Noncommercial 3.0 License http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/.

(Portuguese/ Português translation by Ana Julia Perrotti-Garcia, FFLCH USP SP, Freelance Translator & Interpreter)
Este programa irá ilustrar a forma como o processo de coloração de Gram é capaz de diferenciar as bactérias

gram-positivas e gram-negativas, representando o processo de coloração

em nível ultra-estrutural.

Esta animação é uma, de um série de duas, que mostra a coloração de bactérias gram-positivas

com a representação esquemática da principais estruturas da superfície bacteriana.

O círculo no canto inferior direito mostra a aparência microscópica das bactérias,

se fossem examinadas durante cada etapa do processo de coloração.

Sem a coloração, as bactérias ficariam transparentes e invisíveis ao exame microscópico.

Após fixar a lâmina com calor, aplica-se cristal violeta durante um minuto e, em seguida,

a lâmina é lavada.

O corante pigmenta a parede celular bacteriana em azul e as bactérias ficam azuis

se examinadas ao microscópio neste ponto do procedimento.

Em seguida, aplica-se solução de iodo sobre a lâmina por um minuto, lavou-se novamente.

Durante esta etapa, o cristal violeta e o iodo combinam-se para formar um complexo grande

no interior das camadas da parede celular.

Microscopicamente, as bactérias têm cor azul escura ou preta após esta etapa.

A lâmina é agora enxaguada com um agente descolorante, uma solução de álcool e acetona.

Mas, os complexos de iodo/cristal violeta permanecem nas camadas espessas e tortuosas

da parede celular das bactérias gram-positivas e os microorganismos mantêm a cor azul escura.

POr fim, a lâmina é contra-corada com vermelho neutro ou safranina por um minuto,

sendo lavada novamente.

O corante vermelho também cora as bactérias, mas a cor vermelha não é aparente

devido ao corante azul escuro persistente que domina a aparência microscópica das bactérias.

Assim, pela complexa estrutura multicamadas da parede celular das bactérias gram-positivas,

elas aparecem coradas em azul escuro ou preto ao microscópio após esta coloração.