Staining of a Gram-Positive Bacterium

This short animation demonstrates a gram stain of gram-positive bacterium. This resource was developed by Cary Engleberg of the University of Michigan. It is part of a larger learning module about laboratory methods for clinical microbiology. The full learning module, editable animation, and video transcript are available at http://open.umich.edu/education/med/oernetwork/med/microbiology/clinical-microbio-lab/2009. Copyright 2009-2010, Cary Engleberg. This is licensed under a Creative Commons Attribution Noncommercial 3.0 License http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/.

(French translation by Samuel Scherber)
Cette vidéo vous illustrera comment la procédure de coloration de Gram est capable de distinguer entre les bactéries à Gram positif

et les bactéries à Gram négatif en montrant les événements de coloration au niveau

ultra-structurel.

Cette animation en particulier en fait partie des deux animations qui montre la coloration de bactéries à Gram positif

avec une représentation schématique des structures critiques qui fait partie de la surface bactérienne.

On voit dans le cercle en bas et à droite une représentation de bactéries si elles

étaient examinées par microscope au cours de chaque étape de la procédure de coloration.

Avant la coloration, les bactéries sont transparentes et invisibles au microscope.

Après une fixation à la chaleur de la lame, on l'inonde de cristal violet pendant une minute, puis

la rince.

Le colorant teint bleu la paroi cellulaire bactérienne, et si on les observerait au microscope

pendant ce stade de la procédure, elles apparaîtraient bleues.

Ensuite, la lame est inondée avec une solution d'iode pendant une minute et ensuite de nouveau rincée.

Au cours de cette étape, l'iode et le violet de cristal se mélangent, créant un grand complexe dans

les couches de la paroi cellulaire.

Au microscope on observerrait des bactéries bleu foncées ou noires après avoir terminé cette étape.

La lame est maintenant rincée avec un agent décolorant, comme une solution alcoolique d'acétone.

Cependant, les complexes cristal violets - iode ne sont pas enlevés des couches épaisses et tortueuses

qui composent la paroi cellulaire d'une bactérie à Gram positif, et donc ces organismes gardent une couleur bleu foncé.

Enfin, la lame est contre-colorée avec du rouge neutre ou de safranine pendant une minute et

ensuite rincées de nouveau.

La coloration rouge confère aussi une couleur à la bactérie mais elle n'est pas visible car

la coloration bleu foncée est dominante au microscopique.

Alors, en raison de la structure complexe et multi-coucheuse de la paroi cellulaire Gram-positif, ces bactéries

apparaissent comme bleues foncées ou noires lorsqu'elles sont examinées au microscope après cette coloration.