Staining of a Gram-Negative Bacterium

This short animation demonstrates a gram stain of gram-negative bacterium. This resource was developed by Cary Engleberg of the University of Michigan. It is part of a larger learning module about laboratory methods for clinical microbiology. The full learning module, editable animation, and video transcript are available at http://open.umich.edu/education/med/oernetwork/med/microbiology/clinical-microbio-lab/2009. Copyright 2009-2010, Cary Engleberg. This is licensed under a Creative Commons Attribution Noncommercial 3.0 License http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/.

(Russian translation by Ksenia Skrypnik, Russian Cancer Research Center.)
С помощью этой презентации мы объясним, как окрашивание по Граму помогает различить грамположительные

и грамотрицательные бактерии, для чего рассмотрим, что происходит на каждой стадии

окрашивания.

Это одна из двух анимаций, посвященных окрашиванию по Граму. В ней показан процесс окрашивания грамотрицательных бактерий.

Структуры, расположенные на поверхности бактерий, изображены схематически.

В круге, расположенном в правом нижнем углу, можно будет видеть, как выглядят бактерии под микроскопом

во время каждого из этапов окрашивания.

Перед окрашиванием бактерии прозрачны и невидимы.

После термической фиксации мазка, его помещают на одну минуту в раствор кристаллического фиолетового,

после чего промывают.

Бактериальные стенки окрашиваются в синий цвет

и под микроскопом бактерии выглядят синими.

Далее мазок выдерживают в растворе йода в течение минуты, после чего вновь промывают.

Во время этого этапа йод и кристаллическй фиолетовый образуют комплекс,

располагающийся внутри бактериальной стенки.

Под микроскопом бактерии кажутся темно-синими или черными.

После этого мазок погружают в спиртовой раствор ацетона для обесцвечивания.

Из-за относительно простой структуры клеточной стенки грамотрицательных бактерий

комплекс, образованный йодом и кристаллическим фиолетовым вымывается и бактерии после удаления окраски

вновь становятся прозрачными.

Наконец, для последующего подсчета, мазок в течение минуты выдерживают в нейтральном красном или сафранине,

после чего промывают в последний раз.

Бактерии окрашиваются в красный цвет, который заметен при микроскопическом исследовании.

Таким образом, из-за простой структуры клеточной стенки грамотрицательных бактерий, после окрашивания они имеют красный цвет,

что можно увидеть при микроскопическом исследовании.