Staining of a Gram-Negative Bacterium

This short animation demonstrates a gram stain of gram-negative bacterium. This resource was developed by Cary Engleberg of the University of Michigan. It is part of a larger learning module about laboratory methods for clinical microbiology. The full learning module, editable animation, and video transcript are available at http://open.umich.edu/education/med/oernetwork/med/microbiology/clinical-microbio-lab/2009. Copyright 2009-2010, Cary Engleberg. This is licensed under a Creative Commons Attribution Noncommercial 3.0 License http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/.

Ce programme vous montrera comment la procédure de coloration de Gram est capable de distinguer entre les bactéries à Gram positif

et les bactéries en montrant les événements de coloration qui se déroulent au

niveau ultra-structurel.

Cette animation, qui en fait partie d'une série de deux, montre en particulier la coloration de

bactéries à Gram négatif en représentant les structures critiques de la surface bactérienne en forme schématique.

On voit dans le cercle en bas et à droite ce que l'on voyerait si on examinait les bactéries au microscope

au cours de chaque étape de la procédure de coloration.

Avant la coloration, les bactéries seraient transparentes et invisibles.

Après avoir fixé à la chaleur les bactéries sur la lame, on procède d'inonder la lame avec de cristal violet pendant une minute, et puis

la rincée.

La paroi cellulaire bactérienne est alors teintée par la coloration, et les bactéries apparaîtront bleuâtre au

microscope si on l'examine à ce stade de la procédure.

Ensuite, la lame est inondée avec une solution d'iode pendant une minute et puis de nouveau rincée.

Au cours de cette étape, le violet de cristal et l'iode se combinent pour former une plus grande complexe dans

les couches de la paroi cellulaire.

Au microscope les bactéries apparaissent bleues foncées ou noires après cette étape.

De suite, la lame est lavée avec un agent décolorant, comme une solution alcoolique d'acétone.

En raison de la simplicité relative de la paroi cellulaire d'une bactérie à Gram négatif, les complexes cristal violet-iode

peuvent être emportés dans cette étape et les organismes apparaîtront de nouveau transparents

à ce stade, car la coloration sombre en a été emportée.

Enfin, la lame est contre-colorée avec le rouge neutre ou safranine pendant une minute et

ensuite rincée pour la dernière fois.

La tache rouge confère aux bactéries une couleur rouge, et cette couleur domine leur apparences au microscope.

Donc, en vertu de la simple structure de leur paroi cellulaire, les bactéries à Gram négatif prennent

une couleur rouge au microscope après cette procédure de coloration.