1
00:00:03,000 --> 00:00:11,929
(French translation by Samuel Scherber)
[Musique]

2
00:00:11,929 --> 00:00:21,000
Étape 1. Faire un frottis

3
00:00:21,000 --> 00:00:28,038
Avant de prélever un inoculum d'une boîte de pétri, passez la pointe jaune ou cure-dent dans une flamme.

4
00:00:28,038 --> 00:00:35,000
Vous devriez aussi mettre sur la lame une goutte d'enduit.

5
00:00:35,000 --> 00:00:40,098
Prélevez une colonie, en touchant/frottant doucement la pointe jaune ou cure-dent stérile dans une partie la boîte de pétri.

6
00:00:40,098 --> 00:00:47,069
Emulssionez la colonie avec l'enduit sur la lame pour créer

7
00:00:47,069 --> 00:00:54,099
un frottis d'environ deux à trois centimètres de large.

8
00:00:54,099 --> 00:00:59,000
Étape 2. Fixer la lame doucement à la chaleur (après qu'il ait été séché à l'air.)

9
00:00:59,000 --> 00:01:05,469
Ainsi, après le séchage à l'air, fixer à la chaleur la lame en la passant trois ou quatre fois

10
00:01:05,469 --> 00:01:07,619
dans une flamme.

11
00:01:07,619 --> 00:01:12,024
Cela tue l'organisme,

12
00:01:12,024 --> 00:01:18,061
vous permettant de le coller sur la lame, empêchant de plus l'autolyse et rendant l'organisme

13
00:01:18,061 --> 00:01:21,017
perméable à la coloration.

14
00:01:21,017 --> 00:01:25,003
Étape 3. Recouvrir le frottis avec du cristal violet

15
00:01:25,003 --> 00:01:36,000
Déposer sur le frottis quelques gouttes de cristal violet pendant une minute.

16
00:01:36,000 --> 00:01:42,149
Laissez-le agir 60 secondes.

17
00:01:42,149 --> 00:01:58,000
Jeter l'excès de cristal violet et rincer la lame sous l'eau douce d'un robinet.

18
00:01:58,000 --> 00:02:05,063
Étape 4. Inonder la lame avec la solution de Lugol

19
00:02:05,063 --> 00:02:14,005
Recouvrir le frottis avec une solution de Lugol pendant une minute.

20
00:02:14,005 --> 00:02:18,249
Laissez-le agir 60 secondes.

21
00:02:18,249 --> 00:02:22,999
Rincer l'excès de solution de Lugol de la lame en la passant dans de l'eau du robinet douce.

22
00:02:22,999 --> 00:02:31,057
L'étape 5. Décolorer brièvement le frottis avec de l'acétone.

23
00:02:31,057 --> 00:02:40,209
Décolorer le frottis avec de l'acétone pendant dix secondes.

24
00:02:40,209 --> 00:02:52,249
Jeter l'excès d'alcool, puis rincer la lame sous l'eau du robinet, l'eau du robinet douce.

25
00:02:52,249 --> 00:02:58,319
L'étape 6. Contre-colorer avec du rouge neutre (ou du safranine).

26
00:02:58,319 --> 00:03:03,919
Utilisez du rouge neutre pour contre-colorer la lame pendant une minute.

27
00:03:03,919 --> 00:03:07,939
Recouvrir le frottis avec du rouge neutre.

28
00:03:07,939 --> 00:03:14,609
Laissez-le agir 60 secondes.

29
00:03:14,609 --> 00:03:26,029
Jeter le rouge neutre excès et laver la lame sous l'eau du robinet.

30
00:03:26,029 --> 00:03:31,639
Epongez la lame jusqu'au séchage avec un papier filtre ou un papier buvard.

31
00:03:31,639 --> 00:03:36,000
Ne la frottez pas.

32
00:03:36,000 --> 00:03:48,969
La lame est maintenant prête pour être examinée au microscope à 100X (huile à immersion).

33
00:03:48,969 --> 00:04:01,019
Mettez l'huile à immersion sur la partie de lame où se trouve le frottis.

34
00:04:01,019 --> 00:04:04,209
Puis, mettre la lame sous le microscope.

35
00:04:04,209 --> 00:04:08,209
Nous utilisons l'objectif cinq cents (500X zoom). Examiner la lame.