WEBVTT

00:00:03.000 --> 00:00:12.000
(Spanish/Español translation by Juliana Salomón, BA, Argentina. Reviewed by Dr. Gabriela Gorelik, University of Michigan)
[Música]

00:00:11.929 --> 00:00:16.929
Paso 1. Preparar el frotis

00:00:21.000 --> 00:00:28.380
Preparar el frotis calentando el asa bacteriológica y tomando el inóculo a partir de un cultivo fresco...

00:00:28.380 --> 00:00:35.000
después de haber puesto una gota de sellador en un portaobjetos.

00:00:35.000 --> 00:00:40.980
Tomar un cultivo y sumergir parte del inóculo en él.

00:00:40.980 --> 00:00:47.690
Tomar el cultivo y mezclarlo con el sellador para lograr...

00:00:47.690 --> 00:00:54.690
un frotis de alrededor de dos o tres centímetros.

00:00:54.990 --> 00:00:58.800
Paso 2. Calentar suavemente el portaobjetos (después haberse secado al aire)

00:00:59.000 --> 00:01:05.468
Así, una vez seco, calentar el frotis pasándolo sobre la llama unas tres...

00:01:05.468 --> 00:01:07.619
o cuatro veces.

00:01:07.619 --> 00:01:12.240
Esto hace que el organismo muera,

00:01:12.240 --> 00:01:18.610
y permite que se pegue al portaobjetos, evitando la autólisis y hace que el organismo...

00:01:18.610 --> 00:01:20.670
sea permeable a la tinta.

00:01:21.170 --> 00:01:24.030
Paso 3. Agregar al frotis violeta de genciana

00:01:25.030 --> 00:01:31.330
Agregar al frotis violeta de genciana durante un minuto.

00:01:36.000 --> 00:01:39.330
para dejar que se tiña.

00:01:42.149 --> 00:01:51.549
Retire el exceso del colorante y lave suavemente con agua corriente.

00:01:58.000 --> 00:02:01.290
Paso 4. Inundar el portaobjetos con una solución de yodo de Lugol

00:02:05.630 --> 00:02:12.629
Cubrir el frotis con solución yodada de Lugol durante un minuto.

00:02:14.500 --> 00:02:17.629
Dejar que se tiña durante 60 segundos.

00:02:18.249 --> 00:02:22.749
Lavar el exceso del colorante con agua corriente.

00:02:22.999 --> 00:02:25.599
Paso 5. Decolorar brevemente con acetona.

00:02:31.570 --> 00:02:39.870
Decolorar el frotis con acetona durante diez segundos.

00:02:40.209 --> 00:02:47.209
Retirar el exceso de alcohol y lave con agua corriente.

00:02:52.249 --> 00:02:55.849
Paso 6. Contratinción con rojo neutro (o safranina)

00:02:58.319 --> 00:03:03.919
Usar rojo neutro, para contra teñir, durante un minuto.

00:03:03.919 --> 00:03:07.139
Cubrir el frotis con el rojo neutro.

00:03:07.939 --> 00:03:11.139
Dejar que se tiña durante 60 segundos.

00:03:14.609 --> 00:03:21.909
Lavar el exceso de rojo neutro con agua corriente.

00:03:26.290 --> 00:03:31.339
Secarlo con un papel filtro o un papel secante.

00:03:31.639 --> 00:03:34.889
No limpiarlo.

00:03:36.000 --> 00:03:38.680
Ahora el portaobjetos está listo para ser examinado al microscopio con 100X (con aceite de inmersión).

00:03:48.969 --> 00:03:55.969
Poner aceite de inmersión sobre el frotis en el portaobjetos.

00:04:01.019 --> 00:04:04.209
Poner la diapositiva bajo el microscopio.

00:04:04.209 --> 00:04:09.699
Estamos usando el objetivo quinientos (500X zoom). Examinar el portaobjetos.