1
00:00:03,000 --> 00:00:12,000
(Spanish/Español translation by Juliana Salomón, BA, Argentina. Reviewed by Dr. Gabriela Gorelik, University of Michigan)
[Música]

2
00:00:11,929 --> 00:00:16,929
Paso 1. Preparar el frotis

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00:00:21,000 --> 00:00:28,380
Preparar el frotis calentando el asa bacteriológica y tomando el inóculo a partir de un cultivo fresco...

4
00:00:28,380 --> 00:00:35,000
después de haber puesto una gota de sellador en un portaobjetos.

5
00:00:35,000 --> 00:00:40,980
Tomar un cultivo y sumergir parte del inóculo en él.

6
00:00:40,980 --> 00:00:47,690
Tomar el cultivo y mezclarlo con el sellador para lograr...

7
00:00:47,690 --> 00:00:54,690
un frotis de alrededor de dos o tres centímetros.

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00:00:54,990 --> 00:00:58,800
Paso 2. Calentar suavemente el portaobjetos (después haberse secado al aire)

9
00:00:59,000 --> 00:01:05,468
Así, una vez seco, calentar el frotis pasándolo sobre la llama unas tres...

10
00:01:05,468 --> 00:01:07,619
o cuatro veces.

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00:01:07,619 --> 00:01:12,240
Esto hace que el organismo muera,

12
00:01:12,240 --> 00:01:18,610
y permite que se pegue al portaobjetos, evitando la autólisis y hace que el organismo...

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00:01:18,610 --> 00:01:20,670
sea permeable a la tinta.

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00:01:21,170 --> 00:01:24,030
Paso 3. Agregar al frotis violeta de genciana

15
00:01:25,030 --> 00:01:31,330
Agregar al frotis violeta de genciana durante un minuto.

16
00:01:36,000 --> 00:01:39,330
para dejar que se tiña.

17
00:01:42,149 --> 00:01:51,549
Retire el exceso del colorante y lave suavemente con agua corriente.

18
00:01:58,000 --> 00:02:01,290
Paso 4. Inundar el portaobjetos con una solución de yodo de Lugol

19
00:02:05,630 --> 00:02:12,629
Cubrir el frotis con solución yodada de Lugol durante un minuto.

20
00:02:14,500 --> 00:02:17,629
Dejar que se tiña durante 60 segundos.

21
00:02:18,249 --> 00:02:22,749
Lavar el exceso del colorante con agua corriente.

22
00:02:22,999 --> 00:02:25,599
Paso 5. Decolorar brevemente con acetona.

23
00:02:31,570 --> 00:02:39,870
Decolorar el frotis con acetona durante diez segundos.

24
00:02:40,209 --> 00:02:47,209
Retirar el exceso de alcohol y lave con agua corriente.

25
00:02:52,249 --> 00:02:55,849
Paso 6. Contratinción con rojo neutro (o safranina)

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00:02:58,319 --> 00:03:03,919
Usar rojo neutro, para contra teñir, durante un minuto.

27
00:03:03,919 --> 00:03:07,139
Cubrir el frotis con el rojo neutro.

28
00:03:07,939 --> 00:03:11,139
Dejar que se tiña durante 60 segundos.

29
00:03:14,609 --> 00:03:21,909
Lavar el exceso de rojo neutro con agua corriente.

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00:03:26,290 --> 00:03:31,339
Secarlo con un papel filtro o un papel secante.

31
00:03:31,639 --> 00:03:34,889
No limpiarlo.

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00:03:36,000 --> 00:03:38,680
Ahora el portaobjetos está listo para ser examinado al microscopio con 100X (con aceite de inmersión).

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00:03:48,969 --> 00:03:55,969
Poner aceite de inmersión sobre el frotis en el portaobjetos.

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00:04:01,019 --> 00:04:04,209
Poner la diapositiva bajo el microscopio.

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00:04:04,209 --> 00:04:09,699
Estamos usando el objetivo quinientos (500X zoom). Examinar el portaobjetos.