(Spanish/Español translation by Juliana Salomón, BA, Argentina. Reviewed by Dr. Gabriela Gorelik, University of Michigan) [Música]
Paso 1. Preparar el frotis
Preparar el frotis calentando el asa bacteriológica y tomando el inóculo a partir de un cultivo fresco...
después de haber puesto una gota de sellador en un portaobjetos.
Tomar un cultivo y sumergir parte del inóculo en él.
Tomar el cultivo y mezclarlo con el sellador para lograr...
un frotis de alrededor de dos o tres centímetros.
Paso 2. Calentar suavemente el portaobjetos (después haberse secado al aire)
Así, una vez seco, calentar el frotis pasándolo sobre la llama unas tres...
o cuatro veces.
Esto hace que el organismo muera,
y permite que se pegue al portaobjetos, evitando la autólisis y hace que el organismo...
sea permeable a la tinta.
Paso 3. Agregar al frotis violeta de genciana
Agregar al frotis violeta de genciana durante un minuto.
para dejar que se tiña.
Retire el exceso del colorante y lave suavemente con agua corriente.
Paso 4. Inundar el portaobjetos con una solución de yodo de Lugol
Cubrir el frotis con solución yodada de Lugol durante un minuto.
Dejar que se tiña durante 60 segundos.
Lavar el exceso del colorante con agua corriente.
Paso 5. Decolorar brevemente con acetona.
Decolorar el frotis con acetona durante diez segundos.
Retirar el exceso de alcohol y lave con agua corriente.
Paso 6. Contratinción con rojo neutro (o safranina)
Usar rojo neutro, para contra teñir, durante un minuto.
Cubrir el frotis con el rojo neutro.
Dejar que se tiña durante 60 segundos.
Lavar el exceso de rojo neutro con agua corriente.
Secarlo con un papel filtro o un papel secante.
No limpiarlo.
Ahora el portaobjetos está listo para ser examinado al microscopio con 100X (con aceite de inmersión).
Poner aceite de inmersión sobre el frotis en el portaobjetos.
Poner la diapositiva bajo el microscopio.
Estamos usando el objetivo quinientos (500X zoom). Examinar el portaobjetos.