0:00:03.000,0:00:12.000 (Spanish/Español translation by Juliana Salomón, BA, Argentina. Reviewed by Dr. Gabriela Gorelik, University of Michigan)[br][Música] 0:00:11.929,0:00:16.929 Paso 1. Preparar el frotis 0:00:21.000,0:00:28.380 Preparar el frotis calentando el asa bacteriológica y tomando el inóculo a partir de un cultivo fresco... 0:00:28.380,0:00:35.000 después de haber puesto una gota de sellador en un portaobjetos. 0:00:35.000,0:00:40.980 Tomar un cultivo y sumergir parte del inóculo en él. 0:00:40.980,0:00:47.690 Tomar el cultivo y mezclarlo con el sellador para lograr... 0:00:47.690,0:00:54.690 un frotis de alrededor de dos o tres centímetros. 0:00:54.990,0:00:58.800 Paso 2. Calentar suavemente el portaobjetos (después haberse secado al aire) 0:00:59.000,0:01:05.468 Así, una vez seco, calentar el frotis pasándolo sobre la llama unas tres... 0:01:05.468,0:01:07.619 o cuatro veces. 0:01:07.619,0:01:12.240 Esto hace que el organismo muera, 0:01:12.240,0:01:18.610 y permite que se pegue al portaobjetos, evitando la autólisis y hace que el organismo... 0:01:18.610,0:01:20.670 sea permeable a la tinta. 0:01:21.170,0:01:24.030 Paso 3. Agregar al frotis violeta de genciana 0:01:25.030,0:01:31.330 Agregar al frotis violeta de genciana durante un minuto. 0:01:36.000,0:01:39.330 para dejar que se tiña. 0:01:42.149,0:01:51.549 Retire el exceso del colorante y lave suavemente con agua corriente. 0:01:58.000,0:02:01.290 Paso 4. Inundar el portaobjetos con una solución de yodo de Lugol 0:02:05.630,0:02:12.629 Cubrir el frotis con solución yodada de Lugol durante un minuto. 0:02:14.500,0:02:17.629 Dejar que se tiña durante 60 segundos. 0:02:18.249,0:02:22.749 Lavar el exceso del colorante con agua corriente. 0:02:22.999,0:02:25.599 Paso 5. Decolorar brevemente con acetona. 0:02:31.570,0:02:39.870 Decolorar el frotis con acetona durante diez segundos. 0:02:40.209,0:02:47.209 Retirar el exceso de alcohol y lave con agua corriente. 0:02:52.249,0:02:55.849 Paso 6. Contratinción con rojo neutro (o safranina) 0:02:58.319,0:03:03.919 Usar rojo neutro, para contra teñir, durante un minuto. 0:03:03.919,0:03:07.139 Cubrir el frotis con el rojo neutro. 0:03:07.939,0:03:11.139 Dejar que se tiña durante 60 segundos. 0:03:14.609,0:03:21.909 Lavar el exceso de rojo neutro con agua corriente. 0:03:26.290,0:03:31.339 Secarlo con un papel filtro o un papel secante. 0:03:31.639,0:03:34.889 No limpiarlo. 0:03:36.000,0:03:38.680 Ahora el portaobjetos está listo para ser examinado al microscopio con 100X (con aceite de inmersión). 0:03:48.969,0:03:55.969 Poner aceite de inmersión sobre el frotis en el portaobjetos. 0:04:01.019,0:04:04.209 Poner la diapositiva bajo el microscopio. 0:04:04.209,0:04:09.699 Estamos usando el objetivo quinientos (500X zoom). Examinar el portaobjetos.