0:00:00.359,0:00:06.001 (Spanish/Español translation by Juliana Salomón, BA, Argentina. Reviewed by Dr. Gabriela Gorelik, University of Michigan.)[br]Los ensayos de aglutinación se han utilizado durante décadas como un método sencillo para detectar sustancias antigénicas... 0:00:06.001,0:00:07.091 en muestras biológicas. 0:00:07.091,0:00:12.559 El propósito de este video es explicar cómo funciona este método en la práctica y revelar... 0:00:12.559,0:00:15.699 sus limitaciones. 0:00:15.699,0:00:20.002 El ensayo de aglutinación utiliza partículas diminutas, en general, perlas de látex. 0:00:20.002,0:00:24.059 Las perlas están recubiertas con un anticuerpo específico contra el antígeno que se desea... 0:00:24.059,0:00:27.051 detectar. 0:00:27.051,0:00:33.053 El examen se realiza generalmente en una tarjeta o un portaobjetos de vidrio o plástico, a menudo con una superficie... 0:00:33.053,0:00:34.097 negra. 0:00:34.097,0:00:39.093 En primer lugar se agrega una suspensión de las perlas de látex recubiertas a cada una de las tres áreas rodeadas... 0:00:39.093,0:00:41.041 en el portaobjetos. 0:00:41.041,0:00:49.075 Tenga en cuenta que la suspensión se concentra lo suficiente como para tener una apariencia lechosa en el fondo. 0:00:49.075,0:00:53.061 Ahora se añade unas gotas de la muestra desconocida que se está estudiando. 0:00:53.061,0:00:59.001 También tendrá que utilizar uno de los círculos para el control negativo que... 0:00:59.001,0:01:04.011 no contenga antígenos, y otro para el control positivo que sí contenga el antígeno... 0:01:04.011,0:01:12.092 de interés. 0:01:12.092,0:01:20.002 A continuación, el portaobjetos se sacude suavemente o se arremolina para mezclar las perlas con las soluciones de ensayo, y... 0:01:20.002,0:01:25.058 las muestras que contienen el antígeno de interés comienzan a aglutinar las perlas. 0:01:25.058,0:01:29.079 Esto producirá la formación de grumos visibles y la solución pasará... 0:01:29.079,0:01:34.003 de un aspecto lechoso a uno claro y transparente. 0:01:34.003,0:01:36.979 Esta transición debe ocurrir en el área con el control positivo. 0:01:36.979,0:01:41.093 Si el antígeno está presente en la muestra desconocida entonces se forman grumos. 0:01:41.093,0:01:47.053 El control negativo debe permanecer sin grumos y opaco. 0:01:47.053,0:01:52.549 Recordemos que las perlas de látex se recubren con un anticuerpo específico de modo que cada perla puede... 0:01:52.549,0:01:54.084 unir numerosos antígenos 0:01:54.084,0:02:00.006 Para que la aglutinación funcione, el antígeno de interés también debe ser capaz de unirse a muchas perlas. 0:02:00.006,0:02:05.939 Por lo tanto, en este ensayo, los antígenos que pueden ser detectados se limitan a macromoléculas grandes... 0:02:05.939,0:02:09.058 que tienen dominios antigénicos repetitivos. 0:02:09.058,0:02:15.459 Moléculas como cápsulas microbianas, flagelos o lipopolisacáridos. 0:02:15.459,0:02:20.001 Una larga molécula repetidora de antígenos se puede conectar a varias perlas haciendo que se agrupen... 0:02:20.001,0:02:23.009 o se aglutinen. 0:02:23.009,0:02:27.959 Así que incluso cantidades muy pequeñas de antígenos que tienen muchos dominios antigénicos repetitivos pueden... 0:02:27.959,0:02:32.489 formar grumos visibles y ser detectados por este ensayo. 0:02:32.489,0:02:35.084 Esta es la base del ensayo. 0:02:35.084,0:02:39.084 Finalmente, aquí hay algunos ejemplos de ensayos de aglutinación que se utilizan en la práctica clínica.