Beszéljünk egy kicsit bővebben arról, hogy a DNS hogyan másolja magát, miként replikálódik, és hogy milyen szereplők működnek közre ebben a folyamatban. Eközben sokszor említjük majd a DNS molekula 3' és 5' végeit (3 vessző és 5 vessző). Ha még sosem hallottál erről, akkor nézd meg a videót a DNS antiparallel szerkezetéről. Ismételjük át egy kicsit, ha esetleg régen láttad utoljára. Itt van a DNS részletes ábrája az előbb említett videóból. Az 5' és a 3' jelölés az atomok helyzetét jelzi azokban a ribózmolekulákban, amik ezt a foszfát-cukor gerincet alkotják. Ez itt egy ribóz, ami egy öt szénatomos cukor. Számozzuk meg a szénatomokat: ez az 1' helyzetű szénatom, ez a 2', ez a 3', ez a 4', ez pedig az 5' helyzetű szénatom. A létrának ezen az oldalán az úgynevezett haladási irány... (iderajzolok egy vonalat) 3'-5' irányban fut. Ez a 3' vég, ez pedig az 5' vég. A lefutási iránya 3'-5'. Ez a foszfátcsoport az egyik gyűrű 3' atomjához csatlakozik, amely az 5' atomján át egy másik foszfátcsoporthoz kapcsolódik, az pedig a következő gyűrű 3' atomjához, az pedig... az 5' atomján át egy újabb foszfátcsoporthoz. A másik szál a már említett antiparallel szál. Párhuzamos az előbbivel, de fordított irányban fut. Tehát ez az atom 3' helyzetű, ez 5' helyzetű, ez 3', ez pedig 5' helyzetű. Ezt jelenti tehát az antiparallel szerkezet. A molekula két gerince, (vagyis ez a két szál) egymással párhuzamos, de ellentétes irányultságú. Tehát ez a 3' vég, ez pedig az 5' vég. Ez nagyon fontos ahhoz, hogy megértsük a replikációt, mivel a DNS-polimeráz, amely a soron következő nukleotidokat építi be az újonnan készülő DNS-szálba, csak a 3' véghez tudja hozzákapcsolni az újabb nukleotidokat. Itt például a hosszabbítás csak... csak ebben az irányban végezhető. A másik irányban nem. Úgy is mondhatjuk, hogy az új nukleotidokat csak a 3' véghez kapcsolhatjuk, vagyis a DNS hosszabbítása csak 5'- 3' irányban történhet. Ha csak a 3' véget hosszabbítjuk, akkor az 5' irányból a 3' irányba haladunk. Nem haladhatunk 3'-5' irányba. Nem lehet az 5' végen hosszabbítani a láncot polimerázzal. Mit értünk azon, hogy "polimerázzal"? Vizsgáljuk meg a fenti ábrát, ahol egyben látható a folyamat összes szereplője. Itt látható a DNS-szál, az eredeti formájában, a megkettőződés előtt. Megjelöltük a 3' és az 5' végeket. Végigkövethetők az egyes szálak. Ez a 3' vég, innen végighaladva eljutunk a hozzá tartozó 5' véghez. Ez a kettő tehát egyazon szál két vége. Ezt a szálat követve pedig ide jutunk. Ez tehát a lánc 3' vége, ez pedig az 5' vége. Elsőként, ahogy a korábbi videókban említettük, ahol áttekintettük a replikációt, a hélixet alkotó két szál a két DNS-szálnak szét kell válnia, hogy felépülhessen melléjük a létra másik oldala a szétvált szálak mentén. Akárcsak egy cipzár, amit szétnyitunk, majd mindkét feléhez egy új cipzárat erősítünk x A valóságban viszont sokkal bonyolultabb, mintha csak szétnyitnánk egy cipzárat, aztán újat teszünk rá. Kell hozzá egy rakás enzim, és egyebek, még ezen az ábrán sem látható az összes közreműködő. De a legfontosabb résztvevők igen legalábbis azok, amiket megemlítünk amikor a DNS-replikációró beszélünk. Először is az történik, ez itt szorosan fel van tekeredve. Ezt ide is írom. Szorosan fel van tekeredve. Ha belegondolunk, ez úgy működik, hogy minél jobban széttekerjük az egyik oldalon, annál szorosabban tekeredik a másik oldalon. A cipzár felnyitásához tehát szükséges egy enzim, ami segít széttekerni ezt a szorosan feltekert hélixet. Ez az enzim a topoizomeráz. Úgy működik, hogy időlegesen felhasítja a gerincek egyes pontjait, hogy szétttekeredjen, aztán újra összekapcsolódnak, De a lényeg, hogy széttekeri, hogy aztán a helikáz enzim... A helikáz persze nem úgy néz ki, mint ez a kis háromszög, ami épp hasítja a .. A valóságban ezek sokkal .... ha a valóságban látnánk a helikáz molekuláris szerkezetét. A helikáz feladata az, hogy felszakítsa a hidrogénkötéseket a nitrogéntartalmú bázisok között. Itt épp egy adenin és egy timin közt szakítja fel a hidrogénkötéseket. Első tehát a széttekeredés aztán a hlkáz. A topoizomeráz széttekeri aztán a helikáz felszakítja a kötéseket. Innentől kezdve külön tárgyaljuk a két szálat, mivel, mint említettem, az új nukleotidokat csak 5'-3' irányban kapcsolhatjuk hozzá. Az alsó szálat tehát vezető szálnak nevezzük. Ezen tök egyszerűen halad a folyamat emlékezz, ez az 5' vége, a lánc hosszabbítása tehát ebben az irányban folytatódhat. c Ez az 5'-3' irány. Itt a folyamat elindításához kell egy RNS-primer és az az enzim, amelyik létrehozza az RNS-primert. Ez a DNS-primáz. Erről még beszélünk a követő szál kapcsán de a lányeg, hogy RNS-t kapcsolnak ezt egy másik színnel jelölöm. Ide kapcsolódik egy RNS-primer. Miután a primer ide kapcsolódott, A DNS-polimeráz megkezdheti a további nukleotidok hozzáadását. a 3' véghez. Azért olyan egyszerű a vezető szálon, mert ez a DNS-polimeráz... ismétlem, ezek nem olyan háromszögek, mint ezen a képen, A valóságban sokkal .............. Itt láthatók c Ez a polimeráz csak a cipzár felnyílását követi és eközben újabb és újabb nukleotidokat kapcsol a 3' véghez. Ez elég egyszerű. Könnyű lenne, ha az 5' véghez is kapcsolhatnánk nukleotidokat, hiszen akkor úgy vehetnénk, hogy ez a szál 3'-5' irányban halad, akkor mondjuk egy másik fajta polimeráz hozzákapcsolhatná a nukleotidokat és ezzel a dolog el lenne intézve. A valóságban ez nem így működik. Az 5' véghez nem lehet újabb nukkleotidokat kapcsolni Ez pedig láthatóan a 3' vég erről a szálról beszélek.c Másik színnel rajzolom. c Ezen a szálon ez a 3' vég, ez pedig az 5' vég, c ezért így nem lehet nukleotidokat. Hogyan oldja meg ezt a dolgot a biológia? Primereket ad, ahogy a szétnyílás megtörténik a képen látható, hogy a primer nem csak egy nukleotid hanem általában több mintegy 10 nukleotid Tehát kb. 10 RNS nukleotidot ad ezt a DNS primáz végzi. A DNS-primáz tehát a követő szálon ezen az oldalon, felül, és ad. Bekapcsolja az RNS-primert, ami nem csak egy nukleotid hanem sok Amint megvan az RNS-primer a polimeráz hozzákapcsolhat 5'-3' irányban mindig a 3' véghez. hozzá így Úgy képzelhető el a folyamat jön a promáz, hozzákapcsolja a primert és megkezdődik a lánchosszabbítás 5'-3' irányban. így aztán egy kis ugrás, és ismétlődik. Keletkezik egy sor kis szakasz amelyeket Okazaki-fragmenteknek nevezünk. Okazaki-fragmentek, a követő szálon d miért hívják követő szálnak s mintha tökéletlen volna ezeket az Okazaki-fragmenteket ahogy a felnyílás irányába haladva. így kullog, ez a folyamat lassúbb de a végén minden összekapcsolható a DNS-ligáz segítségével. A DNS-ligáz nem csak összekapcsolja a töredékekeket hanem az RNS-t is kicseréli DNS-re. Így mindezek után van egy másolat d A végére tehát létrejön a két kettős szál. Egy itt fent, a követő szálon, a másik lent a vezető szálon