Beszélgessünk kicsit bővebben arról, hogyan másolja önmagát a DNS, miként replikálódik, és hogy milyen szereplők vesznek részt ebben a folyamatban. Eközben sokszor emlegetjük majd a DNS molekula 3' és 5' végeit (ejtsd: 3 vessző és 5 vessző). Ha még sohasem hallottál erről, akkor nézd meg a videót a DNS antiparallel szerkezetéről. Ismételjük át egy kicsit, ha már régen láttad utoljára. Itt van a DNS részletes ábrája az előbb említett videóból. Az 5' és a 3' jelölés a szénatomok helyzetét jelöli azokban a ribózmolekulákban, amik a molekula foszfát-cukor gerincét alkotják. Ez itt egy ribózmolekula, ami egy öt szénatomos cukor. Számozzuk meg a szénatomokat! Ez az 1' helyzetű szénatom, ez a 2', ez a 3', ez a 4', ez pedig az 5' helyzetű szénatom. Ennek a létraszerű molekulának az egyik oldalán ebben az irányban rajzolok egy nyilat. Ez a nyíl a 3'-5' irányt mutatja. Ez a nyíl 3' vége, ez pedig a nyíl 5' vége. A nyíl iránya 3'-5'. Figyeld: ez a foszfátcsoport egy 3' helyzetű atomhoz kötődik, a következő 5' atom egy foszfátcsoporthoz, az egy 3' helyzetű atomhoz, az pedig... egy 5' atomon át egy újabb foszfátcsoporthoz. A másik szál, mint mondtuk, antiparallel helyzetű. Párhuzamos az előbbivel, de fordított lefutású. Tehát ez az atom 3' helyzetű, ez 5' helyzetű, ez 3', ez pedig 5' helyzetű. Ezt jelenti tehát az antiparallel szerkezet. A molekula két gerince, a két szála párhuzamos, de ellentétes lefutásúak. Tehát ez a 3' vég, ez pedig az 5' vég. Ez nagyon fontos lesz ahhoz, hogy megértsük a replikációt, mivel a DNS-polimeráz, amely a soron következő nukleotidokat építi be az újonnan készülő DNS-szálba, csak a 3' véghez tud újabb nukleotidokat kapcsolni. Ezt a szálat például csak ebbe az irányba lehetne hosszabbítani, fordított irányban nem. Úgy is mondhatjuk, hogy az új nukleotidok csak a 3' véghez kapcsolhatók, vagyis a DNS hosszabbítása csak 5'-3' irányban történhet. Ha csak a 3' véget hosszabbítjuk, akkor 5'-3' irányban haladunk. Nem haladhatunk 3'-5' irányba. Az 5' vég nem hosszabbítható polimerázzal. Mit jelent ez? Vizsgáljuk meg a fenti ábrát, ahol egyben látható a folyamat összes szereplője. Itt látható a DNS-szál, a kiindulási formájában, megkettőződés előtt. Megjelöltük a 3' és az 5' végeit. Végigkövethető mindegyik gerinc. Ez a 3' vég, innen kiindulva eljutunk a hozzá tartozó 5' véghez. Ez a kettő tehát egyazon szálnak a két vége. Ezt a szálat követve pedig ide jutunk. Ez a lánc 3' vége, ez pedig az 5' vége. Elsőként, ahogy a korábbi videókban említettük, ahol áttekintettük a replikációt, a hélix két felének a kettős hélix két DNS-szálának szét kell válnia, hogy újraépíthessük a létra másik oldalát a különvált szálak mellé. Olyan ez, mint egy cipzár. Szétnyitjuk, és kiegészítjük mindkét fél cipzárt. A valóságban mindez jóval bonyolultabb, mint egy szétnyitott cipzár, amiből két újat csinálunk. Kell egy rakás enzim, és más egyebek. Még ezen az ábrán sem látható az összes résztvevő, csak a legfontosabbak, amik szóba kerülnek a DNS-replikáció kapcsán. Először is, ez a rész szorosan fel van tekeredve. Ezt ide is írom. Szorosan fel van tekeredve. Ha belegondolunk, minél jobban széttekeredik az egyik oldalon, annál szorosabban tekeredik össze a másikon. A cipzár felnyitásához kell egy enzim, ami széttekeri ezt a szorosan összetekert hélixet. Ez az enzim a topoizomeráz. Úgy működik, hogy időlegesen felhasítja a gerincek egyes pontjait, hogy szétttekeredjenek, majd újra összekapcsolódnak. A lényeg, hogy széttekeri őket, hogy aztán a helikáz enzim... A helikáz persze nem olyan, mint ez a kis háromszög, ami itt vagdossa a kötéseket. A valóságban elképesztő látványt nyújtana a helikáz molekuláris szerkezete. A helikáznak az a feladata, hogy felszakítsa a hidrogénkötéseket a nitrogéntartalmú bázisok között. Itt épp egy adenin és egy timin közt szakítja fel a hidrogénkötéseket. Első tehát a széttekerés, aztán a helikáz... illetve a topoizomeráz széttekeri, aztán a helikáz felszakítja a kötéseket. Innentől a két szálon másféleképpen zajlik a folyamat, mivel, mint említettem, az új nukleotidok beépülése csak 5'-3' irányban lehetséges. Az alsó szálon, az ún. vezető szálon minden nagyon egyszerű. Emlékezz, ez itt az 5' vége, a lánc hosszabbítása tehát ebben az irányban történik. Ez az 5'-3' irány. Az itteni események elindításához kell egy RNS-primer. Az RNS-primert a DNS-primáz -......... Erről még beszélünk a követő szál kapcsán. Ez RNS-t kapcsol... (ezt más színnel jelölöm) Ide készít egy RNS-primert. Amint létrejött a primer, a DNS-polimeráz elkezdheti a nukleotidok hozzákapcsolását a 3' véghez. Azért egyszerű a vezető szál hosszabbítása, mert a DNS-polimeráz... Ezek persze nem olyan háromszögek, mint ezen a képen, a valóságban ennél sokkal látványosabbak. Fent látható az egyik DNS-polimeráz, a másik lent. Ez a polimeráz a cipzár szétnyílását követve újabb és újabb nukleotidokat kapcsol a 3' véghez. Ez elég egyszerű. Nyilván könnyű lenne ugyanígy kapcsolni a nukleotidokat az 5' véghez is, hiszen akkor 3'-5' irányban haladva (mondjuk egy másfajta polimerázzal) hozzákapcsolhatnánk a nukleotidokat, és ezzel a dolog el lenne intézve. Sajnos ez nem így működik. Az 5' véghez nem lehet újabb nukleotidokat kapcsolni. Tisztázzuk, ez a 3' vég, erről a szálról beszélek. Ezt a szálat más színnel rajzolom. Ennek a szálnak ez a 3' vége, és ez az 5' vége, ezért nem lehet errefelé hosszabbítani. Hogyan oldja meg ezt a dolgot a biológia? Primerekkel ahogy a molekula szétnyílik a képen látható, hogy a primer nem csak egy nukleotidot hanem általában többet, mintegy 10 nukleotidot. Tehát kb. 10 RNS nukleotidot ad ezt a DNS primáz végzi. A DNS-primáz tehát a követő szálon ezen az oldalon, felül, és hosszabbítja Bekapcsolja az RNS-primert, ami nem csak egy nukleotid hanem sok. Ha már elkészült az RNS-primer, a polimeráz hosszabbítja 5'-3' irányban mindig a 3' végen. hozzá így Úgy képzelhető el a folyamat, jön a primáz, hozzákapcsolja a primert és megkezdődik a lánchosszabbítás 5'-3' irányban. így aztán egy kis ugrás, és ismétlődik. Sok rövid szakasz keletkezik amelyeket Okazaki-fragmenteknek nevezünk. Okazaki-fragmentek, a követő szálon d miért hívják követő szálnak s mintha tökéletlen volna ezeket az Okazaki-fragmenteket ahogy a felnyílás irányába haladva. így kullog, ez a folyamat lassúbb de a végén minden összekapcsolható a DNS-ligáz segítségével. A DNS-ligáz nem csak összekapcsolja a töredékekeket hanem az RNS-t is kicseréli DNS-re. Így mindezek után van egy másolat d A végére tehát létrejön a két kettős szál. Egy itt fent, a követő szálon, a másik lent a vezető szálon.