Beszélgessünk kicsit bővebben arról, hogyan másolja önmagát a DNS, miként replikálódik, és hogy milyen szereplők vesznek részt ebben a folyamatban. Eközben sokszor említjük majd a DNS molekula 3' és 5' végeit (ejtsd: 3 vessző és 5 vessző). Ha még sohasem hallottál erről, akkor nézd meg a videót a DNS antiparallel szerkezetéről. Ismételjük át egy kicsit, ha régen láttad utoljára. Itt van a DNS részletes ábrája az előbb említett videóból. Az 5' és a 3' jelölés a szénatomok helyzetét jelöli azokban a ribózmolekulákban, amik a molekula foszfát-cukor gerincét alkotják. Ez itt egy ribózmolekula, ami egy öt szénatomos cukor. Számozzuk meg a szénatomokat: ez az 1' helyzetű szénatom, ez a 2', ez a 3', ez a 4', ez pedig az 5' helyzetű szénatom. A bal oldalon ez a létraszerű molekula ebben az irányban fut (iderajzolok egy nyilat). Ez a szál 3'-5' irányban halad. Ez a 3' vég, ez pedig az 5' vég. A lefutási iránya 3'-5'. Ez a foszfátcsoport egy 3' atomhoz kapcsolódik, a következő 5' atom egy foszfátcsoporthoz, az pedig egy 3' atomhoz, az pedig... az 5' atomján át egy újabb foszfátcsoporthoz. A másik szál, mint mondtuk, antiparallel helyzetű. Párhuzamos az előbbivel, de fordított lefutású. Tehát ez az atom 3' helyzetű, ez 5' helyzetű, ez 3', ez pedig 5' helyzetű. Ezt jelenti tehát az antiparallel szerkezet. A molekula két gerince, ez a két szál párhuzamos, de ellentétes lefutású. Tehát ez a 3' vég, ez pedig az 5' vég. Ez nagyon fontos ahhoz, hogy megértsük a replikációt, mivel a DNS-polimeráz, amely a soron következő nukleotidokat építi be az újonnan készülő DNS-szálba, csak a 3' véghez tudja hozzákapcsolni az újabb nukleotidokat. Itt például a hosszabbítás csak ebben az irányban történhet, a másik irányban nem. Úgy is mondhatjuk, hogy az új nukleotidok csak 3' véghez kapcsolhatók, vagyis a DNS hosszabbítása csak 5'-3' irányban történhet. Ha csak a 3' véget hosszabbítjuk, akkor 5'-3' irányban haladunk. Nem haladhatunk 3'-5' irányba. A polimerázzal nem hosszabbíthatunk 5' véget. Hogy értendő az, hogy "polimerázzal"? Vizsgáljuk meg a fenti ábrát, ahol egyben látható a folyamat összes szereplője. Itt látható a DNS-szál, a kiindulási formájában, a megkettőződése előtt. Megjelöltük a 3' és az 5' végeit. Végigkövethetők az egyes gerincek. Ez a 3' vég, innen kiindulva eljutunk a hozzá tartozó 5' véghez. Ez a kettő tehát egyazon szál két vége. Ezt a szálat követve pedig ide jutunk. Ez tehát a lánc 3' vége, ez pedig az 5' vége. Elsőként, ahogy a korábbi videókban említettük, ahol áttekintettük a replikációt, a hélix két felének a kettős hélix két DNS-szálának szét kell válnia, hogy felépülhessen a létra másik oldala, a szétvált szálak mellé. Olyan ez, mint egy cipzár. Szétnyitjuk, és mindkét fél cipzárt kiegészítjük egy újabb cipzárrá. A valóságban mindez sokkal bonyolultabb, mint egy szétnyitott cipzár, amiből két újat csinálunk. Kell egy rakás enzim, és más egyebek. Még ezen az ábrán sem látható az összes résztvevő, csak a legfontosabbak, amik szóba kerülnek a DNS-replikáció kapcsán. Először is, ez a rész szorosan fel van tekeredve. Ezt ide is írom. Szorosan fel van tekeredve. Ha belegondolunk, minél jobban széttekeredik az egyik oldalon, annál szorosabban tekeredik fel a másik oldalon. A cipzár felnyitásához tehát szükséges egy enzim, ami segít széttekerni ezt a szorosan feltekert hélixet. Ez az enzim a topoizomeráz. Úgy működik, hogy időlegesen felhasítja a gerincek egyes pontjait, amik így szétttekerednek, majd újra összekapcsolódnak. A lényeg, hogy széttekeri őket, hogy aztán a helikáz enzim... A helikáz persze nem olyan, mint ez a kis háromszög, ami vagdossa a kötéseket. A valóságban elképesztő látványt nyújtana a helikáz molekuláris szerkezete. A helikáznak az a feladata, hogy felszakítsa a hidrogénkötéseket a nitrogéntartalmú bázisok között. Itt épp egy adenin és egy timin közt szakítja fel a hidrogénkötéseket. Első tehát a széttekeredés, aztán a helikáz... a topoizomeráz széttekeri, aztán a helikáz felszakítja a kötéseket. Innentől kezdve külön tárgyaljuk a két szálat, mivel, mint említettem, az új nukleotidok beépülése csak 5'-3' irányban lehetséges. Az alsó szálat tehát vezető szálnak nevezzük. Ezen minden nagyon egyszerűen történik. Emlékezz, ez az 5' vége, a lánc hosszabbítása tehát ebben az irányban haladhat. Ez az 5'-3' irány. Annyi kell a folyamat elindításához, hogy legyen itt egy RNS-primer illetve egy enzim, amelyik létrehozza az RNS-primert, vagyis a DNS-primáz. Ezekről még beszélünk a követő szál kapcsán. Ezek RNS-t kapcsolnak... (ezt más színnel jelölöm) egy RNS-primert kapcsolnak ide. Miután a primer idekapcsolódott, a DNS-polimeráz elkezdheti a nukleotidok hozzákapcsolását a 3' véghez. Azért egyszerű a vezető szál hosszabbítása, mert ez a DNS-polimeráz... Ezek persze nem olyan háromszögek, mint ezen a képen, a valóságban ennél sokkal látványosabbak. Fent látható az egyik DNS-polimeráz, a másik itt lent. Ez a polimeráz a szétnyíló cipzárt követve újabb és újabb nukleotidokat kapcsol a 3' véghez. Ez elég egyszerű. Nyilván könnyű lenne ugyanígy kapcsolni a nukleotidokat az 5' véghez is, hiszen akkor 3'-5' irányban haladva, mondjuk egy másik fajta polimeráz hozzákapcsolhatná a nukleotidokat, és ezzel a dolog el lenne intézve. Sajnos kiderült, hogy ez nem így működik. Az 5' véghez nem lehet újabb nukkleotidokat kapcsolni Ez pedig láthatóan a 3' vég erről a szálról beszélek.c Másik színnel rajzolom. c Ezen a szálon ez a 3' vég, ez pedig az 5' vég, c ezért így nem lehet nukleotidokat. Hogyan oldja meg ezt a dolgot a biológia? Primereket ad, ahogy a szétnyílás megtörténik a képen látható, hogy a primer nem csak egy nukleotid hanem általában több mintegy 10 nukleotid Tehát kb. 10 RNS nukleotidot ad ezt a DNS primáz végzi. A DNS-primáz tehát a követő szálon ezen az oldalon, felül, és ad. Bekapcsolja az RNS-primert, ami nem csak egy nukleotid hanem sok Amint megvan az RNS-primer a polimeráz hozzákapcsolhat 5'-3' irányban mindig a 3' véghez. hozzá így Úgy képzelhető el a folyamat jön a promáz, hozzákapcsolja a primert és megkezdődik a lánchosszabbítás 5'-3' irányban. így aztán egy kis ugrás, és ismétlődik. Keletkezik egy sor kis szakasz amelyeket Okazaki-fragmenteknek nevezünk. Okazaki-fragmentek, a követő szálon d miért hívják követő szálnak s mintha tökéletlen volna ezeket az Okazaki-fragmenteket ahogy a felnyílás irányába haladva. így kullog, ez a folyamat lassúbb de a végén minden összekapcsolható a DNS-ligáz segítségével. A DNS-ligáz nem csak összekapcsolja a töredékekeket hanem az RNS-t is kicseréli DNS-re. Így mindezek után van egy másolat d A végére tehát létrejön a két kettős szál. Egy itt fent, a követő szálon, a másik lent a vezető szálon