[Script Info]
Title: 
[Events]
Format: Layer, Start, End, Style, Name, MarginL, MarginR, MarginV, Effect, Text
Dialogue: 0,0:00:00.02,0:00:06.08,Default,,0000,0000,0000,,(Russian Translation by Ksenia Skrypnik, Russian Cancer Research Center)\NИммуноферментный анализ или ИФА является одним из наиболее распространенных серологических исследований.
Dialogue: 0,0:00:06.08,0:00:13.09,Default,,0000,0000,0000,,Цель этой анимации - объяснить принцип работы этого метода.
Dialogue: 0,0:00:13.09,0:00:19.75,Default,,0000,0000,0000,,ИФА обычно проводят в микротитровальных планшетах со множеством лунок,
Dialogue: 0,0:00:19.75,0:00:21.10,Default,,0000,0000,0000,,в которых легко готовить необходимые разведения образцов сыворотки.
Dialogue: 0,0:00:21.10,0:00:26.57,Default,,0000,0000,0000,,Для того, чтобы разобраться, как работает иммуноферментный анализ, давайте посмотрим,
Dialogue: 0,0:00:26.57,0:00:29.15,Default,,0000,0000,0000,,что происходит в одной из лунок.
Dialogue: 0,0:00:29.15,0:00:33.07,Default,,0000,0000,0000,,На поверхности лунок находится антиген, необходимый для проведения анализа.
Dialogue: 0,0:00:33.07,0:00:38.18,Default,,0000,0000,0000,,В коммерческих наборах антиген наносится на поверхность лунок производителем.
Dialogue: 0,0:00:38.18,0:00:43.00,Default,,0000,0000,0000,,Сперва следует внести в лунки различные разведения сыворотки, полученной от пациента.
Dialogue: 0,0:00:43.00,0:00:47.43,Default,,0000,0000,0000,,Если в тестируемом образце присутствуют антитела против антигена, то они образуют комплекс антиген-антитело,
Dialogue: 0,0:00:47.43,0:00:49.01,Default,,0000,0000,0000,,локализующийся на дне лунок.
Dialogue: 0,0:00:49.01,0:00:55.00,Default,,0000,0000,0000,,С антигеном на поверхности лунок могут связываться только специфические к этому антигену антитела.
Dialogue: 0,0:00:55.00,0:00:59.83,Default,,0000,0000,0000,,Для удаления несвязавшихся антител лунки промывают.
Dialogue: 0,0:00:59.83,0:01:05.00,Default,,0000,0000,0000,,Далее необходимо добавить раствор животных антител против человеческих антител.
Dialogue: 0,0:01:05.00,0:01:10.01,Default,,0000,0000,0000,,Эти вторые антитела ковалентно связаны с ферментом.
Dialogue: 0,0:01:10.01,0:01:16.98,Default,,0000,0000,0000,,Лунки вновь промывают для удаления несвязавшихся вторых антител.
Dialogue: 0,0:01:16.98,0:01:21.03,Default,,0000,0000,0000,,В конце в лунки добавляют субстратный раствор, который может менять цвет.
Dialogue: 0,0:01:21.03,0:01:26.23,Default,,0000,0000,0000,,Взаимодействие субстрата с ферментом, ковалентно связанным со вторыми антителами, приводит к видимому окрашиванию
Dialogue: 0,0:01:26.23,0:01:27.66,Default,,0000,0000,0000,,раствора.
Dialogue: 0,0:01:27.66,0:01:32.10,Default,,0000,0000,0000,,Развитие окраски в лунках может быть заметно невооруженным глазом
Dialogue: 0,0:01:32.10,0:01:37.06,Default,,0000,0000,0000,,или с помощью спектрофотометра для титровальных планшетов.
Dialogue: 0,0:01:37.06,0:01:42.03,Default,,0000,0000,0000,,Чем сильнее разбавлена сыворотка, тем менее интенсивно проходит реакция,
Dialogue: 0,0:01:42.03,0:01:44.08,Default,,0000,0000,0000,,так как концентрация связанных антител в лунках снижается.
Dialogue: 0,0:01:44.08,0:01:48.08,Default,,0000,0000,0000,,Титром называют самое сильное разведение, при котором различимо развитие окраски.