WEBVTT

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(Portuguese/Português translation by Samantha Abreu, Translator. Reviewed by Ana Julia Perrotti-Garcia, FFLCH USP SP, Freelance Translator & Interpreter.)
O ensaio imunoadsorvente ligado a enzima (ELISA) é um método geralmente útil para testes sorológicos.

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O objetivo desta animação é explicar como este teste funciona.

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As sorologias no ELISA são feitas em placas com orifícios de microtitulação, para facilitar

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o preparo e teste das diluições de soro.

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Para entender melhor como este ensaio é feito, vamos olhar de perto

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o que acontece em um dos orifícios desta placa de ensaio.

00:00:29.149 --> 00:00:33.071
Para realizar o ensaio, os orifícios são revestidos com o antígeno de interesse.

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Para os testes comerciais, esta etapa é feita pelo fabricante do ensaio.

00:00:38.179 --> 00:00:43.000
Para o início dos testes, os orifícios são preenchidos com diferentes diluições do soro do paciente.

00:00:43.000 --> 00:00:47.429
Se anticorpos contra o antígeno estiverem presentes, irão se ligar ao antígeno

00:00:47.429 --> 00:00:49.014
fixado ao fundo dos orifícios.

00:00:49.014 --> 00:00:55.005
Mas apenas os anticorpos específicos para o antígeno se ligarão aos orifícios.

00:00:55.005 --> 00:00:59.829
Os orifícios são então lavados, para remover os anticorpos que não se ligaram.

00:00:59.829 --> 00:01:05.004
Em seguida, é adicionada uma solução contendo um anticorpo animal contra os anticorpos humanos.

00:01:05.004 --> 00:01:10.014
Este segundo anticorpo é conjugado a uma enzima por ligação covalente.

00:01:10.014 --> 00:01:16.979
Os orifícios são lavados novamente, para remover anticorpos conjugados à enzima que não estejam ligados.

00:01:16.979 --> 00:01:21.028
Para finalizar, adiciona-se um substrato cromogênico.

00:01:21.028 --> 00:01:26.229
A interação entre substrato e a enzima conjugada ao segundo anticorpo

00:01:26.229 --> 00:01:27.659
gera cor visível.

00:01:27.659 --> 00:01:32.096
O desenvolvimento da cor nos orifícios do anticorpo específico pode ser visto a olho nu

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ou pode ser quantificado com um leitor eletrônico de placa.

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A reação é menos intensa se a diluição do soro for maior e a quantidade de anticorpo capturado

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nos orifícios for reduzida.

00:01:44.078 --> 00:01:48.078
O título é a maior diluição com desenvolvimento de cor visível.