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00:00:00,021 --> 00:00:06,079
(Portuguese/Português translation by Samantha Abreu, Translator. Reviewed by Ana Julia Perrotti-Garcia, FFLCH USP SP, Freelance Translator & Interpreter.)
O ensaio imunoadsorvente ligado a enzima (ELISA) é um método geralmente útil para testes sorológicos.

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00:00:06,079 --> 00:00:13,092
O objetivo desta animação é explicar como este teste funciona.

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00:00:13,092 --> 00:00:19,749
As sorologias no ELISA são feitas em placas com orifícios de microtitulação, para facilitar

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00:00:19,749 --> 00:00:21,098
o preparo e teste das diluições de soro.

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00:00:21,098 --> 00:00:26,569
Para entender melhor como este ensaio é feito, vamos olhar de perto

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00:00:26,569 --> 00:00:29,149
o que acontece em um dos orifícios desta placa de ensaio.

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00:00:29,149 --> 00:00:33,071
Para realizar o ensaio, os orifícios são revestidos com o antígeno de interesse.

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00:00:33,071 --> 00:00:38,179
Para os testes comerciais, esta etapa é feita pelo fabricante do ensaio.

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00:00:38,179 --> 00:00:43,000
Para o início dos testes, os orifícios são preenchidos com diferentes diluições do soro do paciente.

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00:00:43,000 --> 00:00:47,429
Se anticorpos contra o antígeno estiverem presentes, irão se ligar ao antígeno

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00:00:47,429 --> 00:00:49,014
fixado ao fundo dos orifícios.

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00:00:49,014 --> 00:00:55,005
Mas apenas os anticorpos específicos para o antígeno se ligarão aos orifícios.

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00:00:55,005 --> 00:00:59,829
Os orifícios são então lavados, para remover os anticorpos que não se ligaram.

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00:00:59,829 --> 00:01:05,004
Em seguida, é adicionada uma solução contendo um anticorpo animal contra os anticorpos humanos.

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00:01:05,004 --> 00:01:10,014
Este segundo anticorpo é conjugado a uma enzima por ligação covalente.

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00:01:10,014 --> 00:01:16,979
Os orifícios são lavados novamente, para remover anticorpos conjugados à enzima que não estejam ligados.

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00:01:16,979 --> 00:01:21,028
Para finalizar, adiciona-se um substrato cromogênico.

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00:01:21,028 --> 00:01:26,229
A interação entre substrato e a enzima conjugada ao segundo anticorpo

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00:01:26,229 --> 00:01:27,659
gera cor visível.

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00:01:27,659 --> 00:01:32,096
O desenvolvimento da cor nos orifícios do anticorpo específico pode ser visto a olho nu

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00:01:32,096 --> 00:01:37,061
ou pode ser quantificado com um leitor eletrônico de placa.

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00:01:37,061 --> 00:01:42,027
A reação é menos intensa se a diluição do soro for maior e a quantidade de anticorpo capturado

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00:01:42,027 --> 00:01:44,078
nos orifícios for reduzida.

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00:01:44,078 --> 00:01:48,078
O título é a maior diluição com desenvolvimento de cor visível.