WEBVTT 00:00:00.021 --> 00:00:06.079 (French translation by Samuel Scherber) Le dosage immuno-enzymatique ou 'ELISA' est un format couramment utilisé pour les tests sérologiques. 00:00:06.079 --> 00:00:13.092 Le but de cette animation est d'expliquer comment fonctionne ce test. 00:00:13.092 --> 00:00:19.749 Généralement, on effectue les sérologies ELISA dans des plaques de microtitration à puits multiples afin de 00:00:19.749 --> 00:00:21.098 facilement préparer et tester les dilutions de sérum 00:00:21.098 --> 00:00:26.569 Pour mieux comprendre comment ce test est effectué, regardons de plus près ce qui se passe dans 00:00:26.569 --> 00:00:29.149 l'un des puits de cette plaque d'essai. 00:00:29.149 --> 00:00:33.071 Pour effectuer le test, les puits sont recouverts avec l'antigène d'intérêt. 00:00:33.071 --> 00:00:38.179 Dans le cas des tests commerciaux, cela se ferait par le fabricant du test. 00:00:38.179 --> 00:00:43.000 On commence les tests en remplissant les puits avec des dilutions de sérum du patient. 00:00:43.000 --> 00:00:47.429 Si des anticorps contre l'antigène sont présents, ils se lieront à l'antigène fixé au 00:00:47.429 --> 00:00:49.014 fond des puits. 00:00:49.014 --> 00:00:55.005 Seulement les anticorps reconnaissant ces antigènes se lieront dans les puits. 00:00:55.005 --> 00:00:59.829 Les puits sont ensuite rincés pour retirer tous les anticorps non-liés. 00:00:59.829 --> 00:01:05.004 Ensuite, une solution d'un anticorps animal qui reconnaît les anticorps humains est ajoutée. 00:01:05.004 --> 00:01:10.014 Cet anticorps secondaire est conjugué de manière covalente à une enzyme. 00:01:10.014 --> 00:01:16.979 Les puits sont ensuite rincés de nouveau, cette fois pour enlever tout anticorps conjugué avec enzyme (c'est-à-dire secondaire) non-lié. 00:01:16.979 --> 00:01:21.028 Enfin, une solution d'un substrat d'enzyme chromogène est ajoutée . 00:01:21.028 --> 00:01:26.229 L'interaction entre le substrat et l'enzyme sur l'anticorps secondaire génère un visible 00:01:26.229 --> 00:01:27.659 couleur. 00:01:27.659 --> 00:01:32.096 Le développement de couleur dans les puits de l'anticorps spécifique est visibile à l'oeil nu 00:01:32.096 --> 00:01:37.061 ou peut être quantifié avec grâce au lecteur de plaque électronique. 00:01:37.061 --> 00:01:42.027 Plus le sérum est dilué, la quantité d'anticorps capturé 00:01:42.027 --> 00:01:44.078 dans le puits diminue, et donc, moins la réaction est intense. 00:01:44.078 --> 00:01:48.078 Le titre est définie par la dilution la plus élevée qui a encore développé un couleur définie.