1 00:00:00,021 --> 00:00:06,079 (French translation by Samuel Scherber) Le dosage immuno-enzymatique ou 'ELISA' est un format couramment utilisé pour les tests sérologiques. 2 00:00:06,079 --> 00:00:13,092 Le but de cette animation est d'expliquer comment fonctionne ce test. 3 00:00:13,092 --> 00:00:19,749 Généralement, on effectue les sérologies ELISA dans des plaques de microtitration à puits multiples afin de 4 00:00:19,749 --> 00:00:21,098 facilement préparer et tester les dilutions de sérum 5 00:00:21,098 --> 00:00:26,569 Pour mieux comprendre comment ce test est effectué, regardons de plus près ce qui se passe dans 6 00:00:26,569 --> 00:00:29,149 l'un des puits de cette plaque d'essai. 7 00:00:29,149 --> 00:00:33,071 Pour effectuer le test, les puits sont recouverts avec l'antigène d'intérêt. 8 00:00:33,071 --> 00:00:38,179 Dans le cas des tests commerciaux, cela se ferait par le fabricant du test. 9 00:00:38,179 --> 00:00:43,000 On commence les tests en remplissant les puits avec des dilutions de sérum du patient. 10 00:00:43,000 --> 00:00:47,429 Si des anticorps contre l'antigène sont présents, ils se lieront à l'antigène fixé au 11 00:00:47,429 --> 00:00:49,014 fond des puits. 12 00:00:49,014 --> 00:00:55,005 Seulement les anticorps reconnaissant ces antigènes se lieront dans les puits. 13 00:00:55,005 --> 00:00:59,829 Les puits sont ensuite rincés pour retirer tous les anticorps non-liés. 14 00:00:59,829 --> 00:01:05,004 Ensuite, une solution d'un anticorps animal qui reconnaît les anticorps humains est ajoutée. 15 00:01:05,004 --> 00:01:10,014 Cet anticorps secondaire est conjugué de manière covalente à une enzyme. 16 00:01:10,014 --> 00:01:16,979 Les puits sont ensuite rincés de nouveau, cette fois pour enlever tout anticorps conjugué avec enzyme (c'est-à-dire secondaire) non-lié. 17 00:01:16,979 --> 00:01:21,028 Enfin, une solution d'un substrat d'enzyme chromogène est ajoutée . 18 00:01:21,028 --> 00:01:26,229 L'interaction entre le substrat et l'enzyme sur l'anticorps secondaire génère un visible 19 00:01:26,229 --> 00:01:27,659 couleur. 20 00:01:27,659 --> 00:01:32,096 Le développement de couleur dans les puits de l'anticorps spécifique est visibile à l'oeil nu 21 00:01:32,096 --> 00:01:37,061 ou peut être quantifié avec grâce au lecteur de plaque électronique. 22 00:01:37,061 --> 00:01:42,027 Plus le sérum est dilué, la quantité d'anticorps capturé 23 00:01:42,027 --> 00:01:44,078 dans le puits diminue, et donc, moins la réaction est intense. 24 00:01:44,078 --> 00:01:48,078 Le titre est définie par la dilution la plus élevée qui a encore développé un couleur définie.