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00:00:00,021 --> 00:00:06,519
ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) bezeichnet ein antikörperbasiertes Nachweisverfahren. Es wird auch für serologische Untersuchungen verwendet.

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00:00:06,519 --> 00:00:13,092
Diese Animation soll erklären, wie ELISA funktioniert.

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00:00:13,092 --> 00:00:21,079
Serologische Untersuchungen mittels ELISA werden auf Mikrotiterplatten 
(englisch: microwell plate) durchgeführt. 
Damit kann man verschiedene Verdünnungen 
des Bluts leicht vorbereiten und untersuchen.


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00:00:21,098 --> 00:00:29,139
Zum leichteren Verständnis wollen wir uns anschauen, was in einer dieser Vertiefungen (englisch: wells) der Mikrotiterplatte geschieht.

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00:00:29,149 --> 00:00:33,071
Zuerst werden alle Vertiefungen mit dem passenden Antigen beschichtet.

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00:00:33,071 --> 00:00:38,179
Im Handel sind vom Hersteller fertig beschichtete Mikrotiterplatten erhältlich.

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00:00:38,179 --> 00:00:43,000
Nun füllen wir in die Vertiefungen verschiedene Verdünnungen vom Blutserum des Patienten.

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00:00:43,000 --> 00:00:49,009
Wenn im Blut Antikörper gegen unser Antigen vorhanden sind, dann binden diese Antikörper an die Antigene am Boden der Vertiefung.

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00:00:49,014 --> 00:00:55,005
Doch nur antigenspezifische Antikörper binden an die Vertiefung.

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00:00:55,005 --> 00:00:59,829
Jetzt waschen wir die Vertiefung aus, um nicht gebundene Antikörper zu entfernen.

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00:00:59,829 --> 00:01:05,004
Danach fügen wir eine Lösung aus tierischen Antikörpern, die auf menschliche Antikörper reagieren, hinzu.

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00:01:05,004 --> 00:01:10,014
Dieser zweite Antikörper ist chemisch an ein besonderes Enzym gekoppelt.

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00:01:10,014 --> 00:01:16,979
Wir waschen die Vertiefung noch einmal, dieses Mal um alle nicht gebundenen Antikörper-Enzym-Komplexe zu entfernen.

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00:01:16,979 --> 00:01:21,028
Zuletzt fügen wir ein farbgebendes Substrat hinzu.

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00:01:21,038 --> 00:01:27,669
Das Enzym auf dem zweiten Antikörper erzeugt zusammen mit diesem Substrat eine sichtbare Farbe.

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00:01:27,669 --> 00:01:33,266
Die Farbentwicklung in den Vertiefungen mit dem gesuchten Antikörper kann man mit dem bloßen Auge sehen ...

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00:01:33,266 --> 00:01:37,061
... oder mit einem elektronischen Messgerät exakt bestimmen.

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00:01:37,061 --> 00:01:44,067
Die Farbreaktion ist weniger intensiv, wenn das Blutserum verdünnt ist und entsprechend weniger Antikörper in der Vertiefung festgehalten werden.

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00:01:44,078 --> 00:01:48,622
Als Titer bezeichnet man die höchste Verdünnungsstufe, die gerade noch eine deutliche Farbentwicklung bewirkt.