WEBVTT 00:00:00.299 --> 00:00:05.540 (French translation by Samuel Scherber) Beaucoup de simples tests de diagnostic rapide détectent les antigènes spécifiques dans les échantillons biologiques 00:00:05.540 --> 00:00:08.010 en utilisant une méthode immuno-enzymatique. 00:00:08.010 --> 00:00:14.180 Le but de cette animation est d'expliquer comment un prototype de ce test fonctionne. 00:00:14.180 --> 00:00:19.800 Le dosage immuno-enzymatique peut être fait soit dans une plaque de microtitration à puits multiples soit sur tout autre adhésion 00:00:19.800 --> 00:00:20.550 surface solide. 00:00:20.550 --> 00:00:25.650 Je vais utiliser la plaque de microtitration dans cet exemple. Alors, regardons de plus près à l'un des puits 00:00:25.650 --> 00:00:30.399 de ce test pour voir ce qui se passe lors de la réalisation du dosage. 00:00:30.399 --> 00:00:35.329 On prépare la plaque pour effectuer un test d'abord en liant sur les puits des anticorps 00:00:35.329 --> 00:00:37.980 qui reconnaît l'antigène d'intérêt. 00:00:37.980 --> 00:00:42.219 Puis on remplit les puits avec l'échantillon clinique, qui peut être un échantillon de sérum, 00:00:42.219 --> 00:00:46.780 des sécrétions respiratoires, de la liquide céphalorachidien, de l'urine, ou un autre fluide corporel. 00:00:46.780 --> 00:00:51.179 Si l'antigène est présent dans l'échantillon, il se liera aux anticorps immobilisés. 00:00:51.179 --> 00:00:55.449 Dans cet exemple, la forme verte représente l'antigène d'intérêt pendant que les autres formes 00:00:55.449 --> 00:00:57.710 représentent d'autres molécules présentent dans l'échantillon. 00:00:57.710 --> 00:01:03.050 Toutefois, notons que seulement l'antigène particulier, soit le vert, et aucune des molécules non pertinents, 00:01:03.050 --> 00:01:05.250 se lie aux puits revêtus d'anticorps. 00:01:05.250 --> 00:01:08.270 Cela explique la spécificité du test. 00:01:08.270 --> 00:01:12.860 Les puits sont ensuite rincés pour enlever les antigènes non-liés, ne laissant que l'antigène 00:01:12.860 --> 00:01:15.160 d'intérêt coincé dans les puits. 00:01:15.160 --> 00:01:20.840 Maintenant, un second anticorps, ciblant un autre épitope sur l'antigène d'intérêt est ajouté. 00:01:20.840 --> 00:01:25.570 Ces anticorps-ci sont conjugués de manière covalente à une enzyme symbolisé par le cercle jaune 00:01:25.570 --> 00:01:28.670 à la partie Fc de l'anticorps secondaire. 00:01:28.670 --> 00:01:32.530 Ils se lient à l'antigène qui est fixé dans le puits, ce qui donne un niveau supplémentaire 00:01:32.530 --> 00:01:34.950 à la spécificité du test. 00:01:34.950 --> 00:01:40.360 Les puits sont de nouveau rincés pour éliminer les anticorps non-liés, et dans l'étape finale, une solution 00:01:40.360 --> 00:01:45.040 d'un substrat d'enzyme chromigénique est ajouté. 00:01:45.040 --> 00:01:49.930 L'interaction entre le substrat et l'enzyme capturée génère une couleur visible à l'oeil nu dans 00:01:49.930 --> 00:01:51.830 la solution. 00:01:51.830 --> 00:01:56.300 Au niveau macroscopique, l'apparition de la couleur indique les échantillons qui ont des 00:01:56.300 --> 00:01:59.590 anticorps sécondaires liés à l'antigène cible dans le puits. 00:01:59.590 --> 00:02:03.740 Ainsi, les puits changeant de couleur sont ceux qui contiennent l'antigène d'intérêt, 00:02:03.740 --> 00:02:05.640 ou, en d'autres termes, les résultats positifs.