[Script Info] Title: [Events] Format: Layer, Start, End, Style, Name, MarginL, MarginR, MarginV, Effect, Text Dialogue: 0,0:00:00.30,0:00:05.05,Default,,0000,0000,0000,,(Spanish/Español translation by Paula Corbacho, IES Lenguas Vivas "J R Fernández", Buenos Aires, Argentina. Spanish. Reviewed by Dr. Gabriela Gorelik, University of Michigan)\NMuchas pruebas sencillas de diagnóstico rápido detectan antígenos específicos en muestras biológicas Dialogue: 0,0:00:05.05,0:00:08.00,Default,,0000,0000,0000,,mediante el uso de inmunoensayos enzimáticos. Dialogue: 0,0:00:08.00,0:00:14.02,Default,,0000,0000,0000,,El propósito de esta animación es explicar cómo funciona un prototipo de estos ensayos. Dialogue: 0,0:00:14.02,0:00:19.01,Default,,0000,0000,0000,,El inmunoensayo enzimático se puede realizar en una placa de microtitulación de múltiples pocillos o en cualquier otra superficie de adherencia sólida. Dialogue: 0,0:00:19.01,0:00:20.06,Default,,0000,0000,0000,, Dialogue: 0,0:00:20.06,0:00:25.06,Default,,0000,0000,0000,,En este ejemplo, voy a utilizar la placa de microtitulación, así que veamos más de cerca uno de los pocillos Dialogue: 0,0:00:25.06,0:00:30.40,Default,,0000,0000,0000,,en esta prueba para ver lo que sucede durante la realización del ensayo. Dialogue: 0,0:00:30.40,0:00:35.33,Default,,0000,0000,0000,,La placa se prepara para realizar un ensayo en particular recubriendo los pocillos con anticuerpos Dialogue: 0,0:00:35.33,0:00:37.10,Default,,0000,0000,0000,,que se unirán al antígeno de interés. Dialogue: 0,0:00:37.10,0:00:42.22,Default,,0000,0000,0000,,A continuación, se llenan los pocillos con la muestra clínica, que puede ser una muestra de suero, Dialogue: 0,0:00:42.22,0:00:46.08,Default,,0000,0000,0000,,secreciones respiratorias, fluido cerebroespinal, orina, u otro fluido corporal. Dialogue: 0,0:00:46.08,0:00:51.18,Default,,0000,0000,0000,,Si el antígeno está presente en la muestra, se unirá a los anticuerpos fijados. Dialogue: 0,0:00:51.18,0:00:55.45,Default,,0000,0000,0000,,En este ejemplo, lo verde representa el antígeno de interés, y las demás formas Dialogue: 0,0:00:55.45,0:00:57.07,Default,,0000,0000,0000,,representan otras moléculas de la muestra. Dialogue: 0,0:00:57.07,0:01:03.00,Default,,0000,0000,0000,,Sin embargo, cabe destacar que sólo el antígeno específico -el verde-, a diferencia de las moléculas irrelevantes, Dialogue: 0,0:01:03.00,0:01:05.02,Default,,0000,0000,0000,,se une a los pocillos recubiertos con anticuerpo. Dialogue: 0,0:01:05.02,0:01:08.03,Default,,0000,0000,0000,,Esto explica la especificidad de la prueba. Dialogue: 0,0:01:08.03,0:01:12.09,Default,,0000,0000,0000,,Luego, se lavan los pocillos para eliminar las moléculas que no se unieron, mientras el antígeno Dialogue: 0,0:01:12.09,0:01:15.02,Default,,0000,0000,0000,,de interés queda pegado a los pocillos. Dialogue: 0,0:01:15.02,0:01:20.08,Default,,0000,0000,0000,,Ahora se agrega un segundo anticuerpo, dirigido contra otro epitope del mismo antígeno. Dialogue: 0,0:01:20.08,0:01:25.06,Default,,0000,0000,0000,,Estos anticuerpos están conjugados de forma covalente a una enzima, indicada por el círculo amarillo, Dialogue: 0,0:01:25.06,0:01:28.07,Default,,0000,0000,0000,,en la porción Fc del segundo anticuerpo. Dialogue: 0,0:01:28.07,0:01:32.05,Default,,0000,0000,0000,,Se unen al antígeno que está fijado en el pocillo y esto proporciona un segundo nivel Dialogue: 0,0:01:32.05,0:01:34.10,Default,,0000,0000,0000,,de especificidad al ensayo. Dialogue: 0,0:01:34.10,0:01:40.04,Default,,0000,0000,0000,,Los pocillos se lavan de nuevo para eliminar cualquier anticuerpo suelto y, en el paso final, Dialogue: 0,0:01:40.04,0:01:45.00,Default,,0000,0000,0000,,se añade una solución del sustrato enzimático generador de color. Dialogue: 0,0:01:45.00,0:01:49.09,Default,,0000,0000,0000,,La interacción del sustrato y la enzima capturada genera color visible Dialogue: 0,0:01:49.09,0:01:51.08,Default,,0000,0000,0000,,en la solución. Dialogue: 0,0:01:51.08,0:01:56.00,Default,,0000,0000,0000,,A nivel macroscópico, el desarrollo de color revela las muestras que tienen Dialogue: 0,0:01:56.00,0:01:59.06,Default,,0000,0000,0000,,al segundo anticuerpo unido al antígeno en los pocillos Dialogue: 0,0:01:59.06,0:02:03.07,Default,,0000,0000,0000,,Así, los pocillos que cambian de color son los que contienen el antígeno de interés, Dialogue: 0,0:02:03.07,0:02:05.64,Default,,0000,0000,0000,,es decir, los resultados positivos.