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00:00:00,299 --> 00:00:05,054
(Spanish/Español translation by Paula Corbacho, IES Lenguas Vivas "J R Fernández", Buenos Aires, Argentina. Spanish. Reviewed by Dr. Gabriela Gorelik, University of Michigan)
Muchas pruebas sencillas de diagnóstico rápido detectan antígenos específicos en muestras biológicas

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00:00:05,054 --> 00:00:08,001
mediante el uso de inmunoensayos enzimáticos.

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00:00:08,001 --> 00:00:14,018
El propósito de esta animación es explicar cómo funciona un prototipo de estos ensayos.

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00:00:14,018 --> 00:00:19,008
El inmunoensayo enzimático se puede realizar en una placa de microtitulación de múltiples pocillos o en cualquier otra superficie de adherencia sólida.

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00:00:19,008 --> 00:00:20,055


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00:00:20,055 --> 00:00:25,065
En este ejemplo, voy a utilizar la placa de microtitulación, así que veamos más de cerca uno de los pocillos

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00:00:25,065 --> 00:00:30,399
en esta prueba para ver lo que sucede durante la realización del ensayo.

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00:00:30,399 --> 00:00:35,329
La placa se prepara para realizar un ensayo en particular recubriendo los pocillos con anticuerpos

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00:00:35,329 --> 00:00:37,098
que se unirán al antígeno de interés.

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00:00:37,098 --> 00:00:42,219
A continuación, se llenan los pocillos con la muestra clínica, que puede ser una muestra de suero,

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00:00:42,219 --> 00:00:46,078
secreciones respiratorias, fluido cerebroespinal, orina, u otro fluido corporal.

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00:00:46,078 --> 00:00:51,179
Si el antígeno está presente en la muestra, se unirá a los anticuerpos fijados.

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00:00:51,179 --> 00:00:55,449
En este ejemplo, lo verde representa el antígeno de interés, y las demás formas

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00:00:55,449 --> 00:00:57,071
representan otras moléculas de la muestra.

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00:00:57,071 --> 00:01:03,005
Sin embargo, cabe destacar que sólo el antígeno específico -el verde-, a diferencia de las moléculas irrelevantes,

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00:01:03,005 --> 00:01:05,025
se une a los pocillos recubiertos con anticuerpo.

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00:01:05,025 --> 00:01:08,027
Esto explica la especificidad de la prueba.

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00:01:08,027 --> 00:01:12,086
Luego, se lavan los pocillos para eliminar las moléculas que no se unieron, mientras el antígeno

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00:01:12,086 --> 00:01:15,016
de interés queda pegado a los pocillos.

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00:01:15,016 --> 00:01:20,084
Ahora se agrega un segundo anticuerpo, dirigido contra otro epitope del mismo antígeno.

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00:01:20,084 --> 00:01:25,057
Estos anticuerpos están conjugados de forma covalente a una enzima, indicada por el círculo amarillo,

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00:01:25,057 --> 00:01:28,067
en la porción Fc del segundo anticuerpo.

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00:01:28,067 --> 00:01:32,053
Se unen al antígeno que está fijado en el pocillo y esto proporciona un segundo nivel

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00:01:32,053 --> 00:01:34,095
de especificidad al ensayo.

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00:01:34,095 --> 00:01:40,036
Los pocillos se lavan de nuevo para eliminar cualquier anticuerpo suelto y, en el paso final,

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00:01:40,036 --> 00:01:45,004
se añade una solución del sustrato enzimático generador de color.

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00:01:45,004 --> 00:01:49,093
La interacción del sustrato y la enzima capturada genera color visible

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00:01:49,093 --> 00:01:51,083
en la solución.

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00:01:51,083 --> 00:01:56,003
A nivel macroscópico, el desarrollo de color revela las muestras que tienen

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00:01:56,003 --> 00:01:59,059
al segundo anticuerpo unido al antígeno en los pocillos

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00:01:59,059 --> 00:02:03,074
Así, los pocillos que cambian de color son los que contienen el antígeno de interés,

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00:02:03,074 --> 00:02:05,640
es decir, los resultados positivos.