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(Spanish/Español translation by Paula Corbacho, IES Lenguas Vivas "J R Fernández", Buenos Aires, Argentina. Spanish. Reviewed by Dr. Gabriela Gorelik, University of Michigan)[br]Muchas pruebas sencillas de diagnóstico rápido detectan antígenos específicos en muestras biológicas

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mediante el uso de inmunoensayos enzimáticos.

0:00:08.001,0:00:14.018
El propósito de esta animación es explicar cómo funciona un prototipo de estos ensayos.

0:00:14.018,0:00:19.008
El inmunoensayo enzimático se puede realizar en una placa de microtitulación de múltiples pocillos o en cualquier otra superficie de adherencia sólida.

0:00:19.008,0:00:20.055


0:00:20.055,0:00:25.065
En este ejemplo, voy a utilizar la placa de microtitulación, así que veamos más de cerca uno de los pocillos

0:00:25.065,0:00:30.399
en esta prueba para ver lo que sucede durante la realización del ensayo.

0:00:30.399,0:00:35.329
La placa se prepara para realizar un ensayo en particular recubriendo los pocillos con anticuerpos

0:00:35.329,0:00:37.098
que se unirán al antígeno de interés.

0:00:37.098,0:00:42.219
A continuación, se llenan los pocillos con la muestra clínica, que puede ser una muestra de suero,

0:00:42.219,0:00:46.078
secreciones respiratorias, fluido cerebroespinal, orina, u otro fluido corporal.

0:00:46.078,0:00:51.179
Si el antígeno está presente en la muestra, se unirá a los anticuerpos fijados.

0:00:51.179,0:00:55.449
En este ejemplo, lo verde representa el antígeno de interés, y las demás formas

0:00:55.449,0:00:57.071
representan otras moléculas de la muestra.

0:00:57.071,0:01:03.005
Sin embargo, cabe destacar que sólo el antígeno específico -el verde-, a diferencia de las moléculas irrelevantes,

0:01:03.005,0:01:05.025
se une a los pocillos recubiertos con anticuerpo.

0:01:05.025,0:01:08.027
Esto explica la especificidad de la prueba.

0:01:08.027,0:01:12.086
Luego, se lavan los pocillos para eliminar las moléculas que no se unieron, mientras el antígeno

0:01:12.086,0:01:15.016
de interés queda pegado a los pocillos.

0:01:15.016,0:01:20.084
Ahora se agrega un segundo anticuerpo, dirigido contra otro epitope del mismo antígeno.

0:01:20.084,0:01:25.057
Estos anticuerpos están conjugados de forma covalente a una enzima, indicada por el círculo amarillo,

0:01:25.057,0:01:28.067
en la porción Fc del segundo anticuerpo.

0:01:28.067,0:01:32.053
Se unen al antígeno que está fijado en el pocillo y esto proporciona un segundo nivel

0:01:32.053,0:01:34.095
de especificidad al ensayo.

0:01:34.095,0:01:40.036
Los pocillos se lavan de nuevo para eliminar cualquier anticuerpo suelto y, en el paso final,

0:01:40.036,0:01:45.004
se añade una solución del sustrato enzimático generador de color.

0:01:45.004,0:01:49.093
La interacción del sustrato y la enzima capturada genera color visible

0:01:49.093,0:01:51.083
en la solución.

0:01:51.083,0:01:56.003
A nivel macroscópico, el desarrollo de color revela las muestras que tienen

0:01:56.003,0:01:59.059
al segundo anticuerpo unido al antígeno en los pocillos

0:01:59.059,0:02:03.074
Así, los pocillos que cambian de color son los que contienen el antígeno de interés,

0:02:03.074,0:02:05.640
es decir, los resultados positivos.