-
research_labs@ واحد آموزشی شرکت طبیاران سیلک یاخته
-
سیکل استانه یا CT، تعداد سیکل های PCR است که
-
نمودار تکثیر ژن از حد استانه تشخیص دستگاه ریل تایم PCR عبور می کند.
-
در ریل تایم، CT به عنوان یک معیار نسبی
-
برای غلظت نمونه هدف در واکنش استفاده می شود.
-
در یک PCR با بازدهی صددرصد،
-
محصول تکثیر شده در هر سیکل دوبرابر می شود.
-
بنابراین تعداد سیکل ها مورد نیاز برای رسیدن به استانه تشخیص
-
به غلظت اولیه نمونه بستگی دارد
-
برای مثال CT=1∆ بین دو نمونه،
-
به این معناست که یک نمونه، نسبت به نمونه دیگر، به میزان دوبرابر از نمونه هدف را دارد.
-
نمونه ی با CT کمتر، ماده اولیه بیشتری داشته است.
-
تفاوت در غلظت اولیه ژن هدف، در بین دو نمونه بدین صورت بیان می شود:
-
دو به توان تفاوت CT در دو نمونه.
-
یعنی CT=4∆ برابر است با نسبت 2 به توان 4 یعنی 16 برابر تفاوت در غلظت اولیه ژن هدف.
-
فاکتورهای زیادی بر روی CT اثر می گذارد:
-
یکی از این فاکتورها، مرحله ریورس ترنس کریپشن است.
-
یک روش برای ارزیابی کیفیت واکنش ریورس ترنس کریپشن،
-
اندازه گیری CT با استفاده از ریورس ترنس کریپشن های مختلف است.
-
نسل های جدید CT ، RT را نشان می دهد که
-
مقدار آن 1-2 تا کمتر از CT ارائه شده از طریق دیگر انزیم ها است.
-
این به این معنی است که نیازی نیست برای شروع واکنش RNA زیادی داشته باشید.
-
اگر CT، یکی کمتر باشد، میزان RNA موردنیاز شما برای شروع، نصف می شود.
-
ویژگی استفاده از RNA کمتر، بسیار مهم است
-
به خصوص زمانی که با RNA جدا شده از یک تک سلولی و یا نمونه بافت FFEP کار می کنید.
-
نوع دیگری از RT قادر به سنتز CDNA قابل تکثیر از طیف وسیعی از غلظت های RNA است
-
که انتخاب بهتری برای RTQ PCR است.
-
research_labs@ مرجع دانلود یدئوهای آموزشی
-
خسته نباشید
